科研产出
O型口蹄疫病毒VP1基因在2种原核表达载体上的表达
《中国畜牧兽医 》 2009 北大核心
摘要：设计1对引物将口蹄疫病毒(foot and mouth disease virus,FMDV)VP1基因克隆到T载体上,通过NdeI和XhoI双酶切VP1基因和pET-28(a),在T4连接酶的作用下构建重组表达载体pET-28a-VP1;然后用EcoR I和XhoI双酶切VP1基因与pET-41(a),在T4连接酶的作用下构建重组表达载体pET-41a-VP1;然后将这2个新构建的载体分别通过热冲击法转化BL21(DE3),37℃不同IPTG浓度和32℃、0.01 mmol/L IPTG诱导表达,SDS-PAGE结果显示pET-28a-VP1的表达量高于pET-41a-VP1,在DTT和乙醇的作用下,二者均没有可溶性蛋白出现。
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牛环形泰勒虫血源细胞的生物反应器培养——营养物质消耗及代谢产物积累对细胞生长繁殖的影响
《草食家畜 》 2009
摘要：本文探讨了牛环形泰勒虫血源细胞活疫苗生产工艺中,营养物质消耗及代谢产物积累对血源细胞在生物反应器批培养中生长的影响。结果表明,牛环形泰勒虫血源细胞在生物反应器中接种5.0×105cells/ml,经60h细胞培养密度达到最大值2.19×106cells/ml。接种后在48h内,细胞生长迅速,未经生长适应期,就直接进入对数生长期;但培养到36h,葡萄糖就基本耗尽,48h后氨浓度上升,使得细胞生长的稳定期非常短暂,仅有12h;随后,细胞培养密度开始下降;96h,氨的积累量达到峰值270.52mg/l,细胞的生长受到明显的抑制,活性迅速下降,细胞生长进入衰亡期。到168h,细胞活力仅有5.91%。可见本次批培养中,营养物质葡萄糖初始浓度(2017.67mg/L)不足,而谷氨酰胺初始浓度可能(2.6mmol/L)偏高。
关键词： 牛环形泰勒虫病 活疫苗 细胞培养 生物反应器 营养与代谢
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新疆褐牛乳脂率变化规律初探
《草食家畜 》 2009
摘要：在新疆乌鲁木齐种牛场新疆褐牛繁育中心根据牛场记录选择1～10泌乳月的142头母牛,采集奶样测定,结果表明:新疆褐牛的平均乳脂率为3.63%,随着年龄的增长而逐渐下降,由3岁的3.71%下降到8岁的3.05%;随着泌乳月的延长,乳脂率呈曲线变化;而且乳脂率随产乳量的增加而呈下降的趋势。
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牛雄性生殖系干细胞的体外诱导分化
《生物工程学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：雄性生殖系干细胞(Male germ-line stem cells,mGSCs)是一群具有高度自我更新能力和分化潜能的细胞,是雄性成体内唯一可复制的二倍体永生细胞。转基因技术与雄性生殖系干细胞异体及异种移植技术相结合,将会为克隆动物、转基因动物生产及一些人类遗传性疾病的基因治疗提供新的机遇与途径。本试验采用组合酶消化和选择贴壁法,对5月龄、6月龄牛胎儿及新生牛雄性生殖系干细胞体外培养及分化进行了研究。试验结果显示,睾丸支持细胞对雄性生殖系干细胞体外增殖、分化所必需的,同时对数期睾丸支持细胞对雄性生殖系干细胞贴壁、增殖与分化效果明显;共培养16 d后,牛雄性生殖系干细胞分化为长形精子细胞,试验建立了牛雄性生殖系干细胞体外诱导培养分化体系。
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大白猪BF基因多态性与繁殖性状及胎盘效率关联研究
《遗传 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：文章以BF基因为产仔数的候选基因,运用PCR-RFLP方法对大白猪BF基因内含子1序列进行分析,发现内含子1第79bp处发生了C→T突变,命名为BF-intron1-C79T。所扩增PCR产物经SmaⅠ酶切后,可分出3种基因型,分别为CC、CT和TT。经χ2适合性检验,大白猪群体在该位点达到了Hardy-Weinberg平衡状态。将不同基因型与总产仔数(TNB)、产活仔数(NBA)、初生重(BW)和胎盘效率(PE)进行关联分析,结果发现,初产母猪在该位点上,CC基因型比CT基因型个体的TNB和NBA均多3.10头,但差异不显著(P>0.05);在BW和PE上,CC基因型均高于CT基因型,差异不显著(P>0.05)。经产母猪在该位点上,CC基因型比TT基因型个体的TNB和NBA分别多3.45头和3.92头,PE高23.80%,均达到显著水平;但CT基因型个体与CC和TT个体之间的TNB、NBA和PE差异不显著(P>0.05)。因此,BF-intron1-C79T位点可作为繁殖性状及胎盘效率的潜在分子育种标记,具有很大的研究价值。
舍饲新疆褐牛犊牛体重与体尺指标的相关及回归分析
《新疆农业科学 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：以2008年2至7月在乌鲁木齐种牛场跟踪测量的272头1～6月龄新疆褐牛犊牛体尺、体重数据为基础材料,探索了舍饲新疆褐牛犊牛的生长规律,分析了其体重与体尺指标的相关性,构建了估测舍饲新疆褐牛犊牛体重的回归模型。结果表明:舍饲新疆褐牛犊牛随着月龄的增加,相对于其他几个性状,更趋向于胸围和体重的快速增长;舍饲新疆褐牛犊牛体重与体高、体斜长、胸围、管围的相关系数分别为0.927、0.913、0.964、0.851,经检验四个相关系数均达到极显著水平(P<0.01);得到了4个估测体重的多元线性回归方程,对于公犊估测值与实测值之间的相关程度分别为0.975和0.973,对于母犊估测值与实测值之间的相关程度均为0.977,均达到极显著水平(P<0.01)。
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两奶牛场布氏杆菌分离鉴定及四种血清学检测方法比较
《中国人兽共患病学报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：目的与方法用虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)、间接酶联免疫吸附试验(iELISA)和竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)4种血清学检测方法对华东区和新疆的两奶牛场的600头奶牛进行了布氏杆菌病检测,采集布氏杆菌病血清学检测为阳性的奶牛的奶样120份,进行病原分离与鉴定。结果分离到细菌17株,经革兰氏染色、柯兹罗夫斯基鉴别染色和PCR鉴定,17株分离菌株均为牛种布氏杆菌;4种血清学检测结果RBT平均阳性率为46.33%,SAT平均阳性率为41.00%,iELISA平均阳性率为48.17%,cELISA平均阳性率为40.50%。结论两奶牛场平均分菌率为14.17%,按国标标准方法SAT检疫血清阳性率为41.00%,RBT的敏感性和特异性为86.36%和85.71%,SAT的敏感性和特异性为84.09%和92.06%,iELISA的敏感性和特异性为86.36%和96.83%,cELISA的敏感性和特异性为95.45%和98.41%。iELISA和cELISA在敏感性和特异性方面均高于RBT和SAT。iELISA和cELISA可作为RBT和SAT的替代方法。
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