科研产出
高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒体外抗体依赖增强作用的初步研究
《黑龙江畜牧兽医 》 2019 北大核心
摘要：为了研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)体外抗体依赖增强作用,试验对HP-PRRSV TJ-92株毒液(1×10~(6.0)TCID_(50)/0.1 mL)进行10倍倍比稀释,与等体积2倍倍比稀释的各稀释度HP-PRRSV TJ-92株特异性阳性血清(中和效价为1∶2~5)中和后,在Marc-145细胞上培养增殖72 h,测定收获毒液的病毒含量。结果表明:能使1×10~(0 )TCID_(50)～1×10~(6.0) TCID_(50 )HP-PRRSV毒液病毒含量增高最大的阳性血清稀释度依次为1∶2~9、1∶2~(10)、1∶2~9、1∶2~8、1∶2~9、1∶2~7、1∶2~8,经计算,HP-PRRSV毒液病毒含量最高可提升1×10~(4.5)TCID_(50)/0.1 mL。说明HP-PRRSV在体外表现出抗体依赖增强作用,且被中和HP-PRRSV含量越低时增强作用越明显。
关键词： 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 抗体依赖增强作用 病毒含量 血清中和试验 TCID_(50)
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纳豆芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌对绵羊生长性能、消化性能和血清生化指标的影响
《中国饲料 》 2019 北大核心
摘要：为研究纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto,BN)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis,BS)对绵羊生长性能、营养物质表观消化率和血清生化指标的影响,试验将体重相近的30只羊分为基础饲粮组(CK组)、基础饲粮+BN组(A组)、基础饲粮+BN+BS组(B组),每组10只.结果表明:(1)与CK组相比,A组平均日增重(ADG)提高32.29 g(P <0.05),B组提高68.00 g(P <0.01),A组和B组之间差异不显著(P> 0.05).(2)B组粗蛋白质的表观消化率比CK组显著提高16.31%(P <0.01),A组与CK组之间差异不显著(P> 0.05).(3)与CK组相比,A组血清尿素氮降低23.44%(P> 0.05)、B组显著下降44.69%(P <0.01).综上,在本试验条件下,饲粮中添加BN可显著提高绵羊的ADG,但复合添加BS的效果更好.同时,饲粮中复合添加BN和BS可显著提高绵羊对粗蛋白质的表观消化率、降低血清尿素氮含量.
关键词： 纳豆芽孢杆菌 枯草芽孢杆菌 绵羊 生长性能 血清生化指标
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猪miR-199a-3p对mTOR基因表达的调控
《动物医学进展 》 2019 北大核心
摘要：通过生物信息学预测miR-199a-3p与mTOR-3′UTR的结合位点,人工合成猪mTOR-3′UTR及突变型片段克隆至双荧光素酶载体上,构建野生型(psiCHECK-2-W-mTOR-3′-UTR)和突变型(psiCHECK-2-M-mTOR-3′-UTR)双荧光素酶报告质粒。给PK-15细胞分别转染miR-199a-3p mimics、negative control和mTOR-3′-UTR野生型/突变型双荧光素酶报告载体,用双荧光素酶试剂盒检测荧光素酶活性,分别采用RT-qPCR和Western blot检测mTOR基因的mRNA和蛋白表达水平。结果表明,将含mTOR-3′-UTR的野生型和突变型双荧光素酶报告质粒与miR-199a-3p mimic共转染PK-15细胞,野生型报告质粒表达的荧光素酶活性显著低于其阴性对照组(P<0.05);转染miR-199a-3p mimics能显著下调mTOR基因mRNA和蛋白的表达(P<0.05),而转染miR-199a-3p Inhibitor组和Inhibitor-NC组相比,mTOR基因蛋白表达差异不显著(P>0.05)。成功构建了猪野生型及突变型mTOR-3′-UTR双荧光素酶报告质粒,通过双荧光素酶试验、RT-qPCR及Western blot证实miR-199a-3p与猪mTOR-3′-UTR存在靶向调控关系。
关键词： miR-199a-3p mTOR基因 表达调控
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新疆畜间布病分子流行病学特征分析
《新疆农业科学 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：【目的】新疆畜间布病流行株的流行病学特征,为新疆制定布病综合性防控措施提供科学依据和技术支撑。【方法】应用AMOS-PCR和MLVA-16方法对新疆畜间30株布鲁菌进行分析鉴定,将测定结果与http://mlva.u-psud.fr数据库提供的国内布鲁菌分离株的数据进行比较,结合软件Bionumerics进行聚类分析。【结果】30株布鲁菌中4株为牛种布鲁菌,26株为羊种布鲁菌。MLVA-16聚类分析结果表明,新疆地区30株布鲁菌可被分为10大基因群(A～J群)22个基因型,新疆地区流行的布鲁菌存在丰富的基因多态性。【结论】MLVA方法可对布鲁菌生物型和株间差异有很高的鉴别力,为布病疫情传染源的追踪和流行株的溯源进化关系提供科学依据。
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新疆地区牛种布鲁菌流行株的分子分型鉴定
《中华地方病学杂志 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：目的 鉴定新疆地区分离的牛种布鲁菌流行株分子分型,确定多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)法在布鲁菌种型水平上的鉴定和鉴别能力.方法 应用优化的布鲁菌特异性PCR(AMOS-PCR)法对2010-2015年新疆地区分离的牛种布鲁菌流行株(n=7)进行鉴定.同时采用MLVA-16法对流行株进行种属和分子分型,将分型结果与http://mlva.u-psud.fr提供的布鲁菌MLVA基因型数据库进行比较,结合Bionumerics 6.6软件进行聚类分析.结果 AMOS-PCR和MLVA-16法对布鲁菌种属鉴定结果一致,均为牛种.MLVA-16法进一步分子分型鉴定结果均为牛种3型,与国内存在的牛种布鲁菌株的种型基本一致.结论 新疆地区分离的牛种布鲁菌流行株分子分型鉴定为牛种3型.MLVA方法可以在种的水平鉴定布鲁菌,对布鲁菌生物型和株间差异有很高的鉴别力,可为鉴别布鲁菌病疫情流行株的溯源进化关系提供依据.
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单核细胞增生李斯特菌新型内化素lmo0549的分子特征及其表达
《江苏农业科学 》 2019 北大核心
摘要：应用PCR技术对单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)新型内化素lmo0549基因进行克隆和测序,并对其进行生物信息学分析;通过扩增获得Lmo0549蛋白氨基端抗原集中区序列,并将其亚克隆至pET-32a(+)表达载体,转入大肠杆菌中用异丙基硫代半乳糖苷(isopropyl β-D-thiogalactoside,简称IPTG)诱导表达,应用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,简称SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(western blot)鉴定重组蛋白的表达形式及其抗原特异性.序列分析结果表明,扩增得到的lmo0549基因全长为2 034 bp,编码677个氨基酸,其信号肽序列是前23个氨基酸,在Lmo0549蛋白氨基酸序列中,从N端到C端分别包括5个富含亮氨酸的重复基序(LRR)、1段PKD重复序列和1个WxL结构域;同时还存在N-联糖基化位点10个、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点14个、蛋白激酶C磷酸化位点15个.同源性分析显示,LM-SB5 lmo0549基因编码的蛋白氨基酸序列与标准株李斯特菌EGD-e,(NC003210.1)蛋白氨基酸序列的同源性为88.04%,且在单核细胞增生李斯特菌中具有较高的保守性.SDS-PAGE分析显示,表达的Lmo0549蛋白氨基端抗原集中区具有与理论值33.8 ku相符的分子质量;蛋白质印迹法分析表明,重组蛋白Lmo0549与LM阳性血清可发生特异性免疫反应,为进一步探讨Lmo0549在LM侵入宿主细胞的分子作用机制奠定了前期基础.
关键词： 单核细胞增生李斯特菌 内化素Lmo0549 克隆 分子特征 原核表达
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不同贮藏条件下鸡胸肉特征腐败菌分析
《食品与机械 》 2019 北大核心
摘要：以宁都黄鸡新鲜鸡胸肉为对象,对4℃真空贮藏、4℃托盘贮藏和25℃托盘贮藏3种方式下生鲜鸡肉菌落总数变化、挥发性盐基氮(TVB-N)值变化和鸡肉表面细菌多样性变化进行了分析。结果显示,4℃托盘贮藏方式下的鸡胸肉理化指标在第7天超过标准要求,4℃真空贮藏方式下的鸡胸肉理化指标在11d的试验期内均在标准要求范围内,25℃托盘贮藏方式下的鸡胸肉理化指标第2天就超过标准要求。细菌多样性分析结果显示,4℃托盘贮藏7d时,鸡胸肉表面细菌以假单胞菌(99.45%)为主;4℃真空贮藏11d时,鸡胸肉表面细菌以假单胞菌(81.08%)和乳酸菌(6.93%)为主;25℃托盘贮藏3d时,鸡胸肉表面细菌以假单胞菌(60.23%)和肠杆菌(28.54%)为主。结合理化特征和表面细菌多样性变化规律分析,确定4℃托盘贮藏和4℃真空贮藏鸡肉中的特征腐败菌均为嗜冷细菌假单胞菌,25℃托盘贮藏的特征腐败菌包括肠杆菌、芽孢杆菌、梭菌和肠球菌。
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Hoxc13基因在苏博美利奴羊胎羔生长发育期不同组织中的表达分析
《新疆农业科学 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：【目的】分析苏博美利奴羊不同组织中Hoxc13基因mRNA的表达量差异,为分子标记辅助育种以及,研究细毛羊主要经济性状,奠定理论基础。【方法】使用RT-PCR技术检测Hoxc13基因在苏博美利奴羊65和135 d皮肤、肌肉和不同内脏组织(心脏、脾脏、肝脏、肺脏、肾脏)中mRNA的表达量,并采用相对定量法对其表达量进行统计分析。【结果】在苏博美利奴羊皮肤、肌肉和不同内脏组织中均有Hoxc13基因的表达,并且在皮肤中的表达量显著高于其它组织(P<0.05),毛囊的形成和毛发生长与Hoxc13基因密切相关。【结论】建立了胎龄分别在65和135 d的苏博美利奴羊,其不同组织中适于定量检测的Hoxc13基因表达量的RT-PCR方法,从分子水平探讨了苏博美利奴羊的组织器官与Hoxc13基因表达之间的内在联系。
关键词： 苏博美利奴羊 RT-PCR 组织 Hoxc13基因
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饲喂不同结构性与非结构性碳水化合物比例日粮对绵羊瘤胃发酵参数的影响
《饲料工业 》 2019 北大核心
摘要：试验旨在研究不同结构性碳水化合物(SC)与非结构性碳水化合物(NSC)比例日粮对绵羊瘤胃发酵参数的影响。选取6只体重为(54.58±2.8)kg、体况相近且装有永久性瘤胃瘘管的哈萨克绵羊作为试验动物,采用有重复的3×3拉丁方试验设计,分别饲喂SC/NSC为2.32、1.60和1.14的3种日粮,试验共3期,每期17 d,其中预试期14 d,正试期3 d,正试期内于饲喂前记为0 h,饲喂后0.5、1、2、4、8、12 h共计7个时间点采集瘤胃液样品。结果表明,饲喂不同SC/NSC日粮条件下:①瘤胃液pH值试验Ⅲ组除饲喂前0 h以外,其它时间点均极显著低于试验Ⅰ、Ⅱ组(P<0.01),试验Ⅱ组与试验Ⅰ组相比差异不显著(P>0.05)。②3个试验组绵羊瘤胃液氨态氮浓度随采食后时间的延长呈先升高后降低变化趋势,采食后2 h瘤胃液氨态氮浓度达到最高;试验Ⅲ组的瘤胃液氨态氮(NH_3-N)浓度均极显著高于试验Ⅰ组和试验Ⅱ组(P<0.01),在饲喂后0.5、1、2、4、8 h,试验Ⅱ组的瘤胃液氨态氮(NH_3-N)浓度均极显著高于试验Ⅰ组(P<0.01)。③在饲喂后4 h,乙酸浓度试验Ⅰ组与试验Ⅲ组相比显著升高(P<0.05),饲喂后8、12 h,试验Ⅰ组与试验Ⅲ组相比极显著升高(P<0.01),试验Ⅱ组与试验Ⅲ组相比差异不显著(P>0.05)。饲喂后0.5、1、2 h,丙酸浓度试验Ⅲ组与试验Ⅰ组相比极显著升高(P<0.01),在饲喂后2 h,试验Ⅱ组与试验Ⅲ组相比差异显著(P<0.05),瘤胃液中丁酸、异丁酸、戊酸、异戊酸的平均浓度随日粮SC/NSC比例的降低呈升高的趋势。由此可见,随着日粮SC/NSC比例的降低,绵羊瘤胃液pH值、乙酸浓度呈降低的趋势,NH_3-N、丙酸浓度呈升高趋势,瘤胃发酵类型由乙酸型发酵为主向丙酸型发酵为主转变。
关键词： 结构性碳水化合物 非结构性碳水化合物 瘤胃发酵 挥发性脂肪酸 绵羊 日粮
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