科研产出
绵羊IGF-1基因慢病毒表达载体的构建及其促肌细胞生长作用研究
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：【目的】克隆绵羊IGF-1基因CDS区,构建绵羊IGF-1基因慢病毒表达载体,分析IGF-1基因在绵羊成肌细胞增殖过程中的作用。【方法】提取绵羊肝组织总RNA,通过RT-PCR方法获得IGF-1全长CDS序列,经测序鉴定后与慢病毒载体pLEX-mcs连接,构建pLEX-IGF-1慢病毒重组表达质粒,并在293T细胞中进行病毒包装和生产。分离培养绵羊原代成肌细胞,并用重组慢病毒使其感染,建立稳定转染pLEX-IGF-1的绵羊成肌细胞系。通过绘制细胞生长曲线,分析过表达IGF-1对绵羊成肌细胞生长的影响;采用流式细胞仪检测细胞周期变化。【结果】克隆获得长518bp的IGF-1CDS区序列。成功构建了pLEX-IGF-1载体,其可在绵羊细胞系中进行稳定表达。通过Western blotting检测显示,IGF-1在293T细胞以及绵羊原代成肌细胞中获得表达,细胞生长曲线显示,稳定表达IGF-1的成肌细胞比对照细胞生长速度显著加快(第1天差异显著(P<0.05),第2~6天差异极显著(P<0.01));细胞周期测定结果显示,稳定表达IGF-1的成肌细胞比对照细胞较早进入S期,且在S期的细胞数目比对照细胞多29.35%。【结论】绵羊IGF-1能够有效促进绵羊成肌细胞的生长。
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新疆天山北坡牧户效益跟踪调查
《草业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为探究草畜平衡技术对定居牧民家庭生产与经营收入的影响效果,按照草畜平衡的要求,通过调整和优化牲畜结构等方法,完成了示范户昌吉市阿什里乡牧民努尔太家庭4年(2009-2012年)生产经营情况的数据收集与整理工作。调查数据表明,畜牧业生产收入较2009年呈增加趋势,增幅分别为126%、263%和289%;畜牧业生产投入较2009年同样呈增加趋势,增幅分别为50.8%、103.9%和75.6%。2009、2010、2011、2012年示范户畜牧业的投入产出比分别为1∶1.34,1∶1.70,1∶1.71和1∶2.79,2010、2011、2012年示范户纯收入分别为51 809.20、124 439.90和182 810.00元,家庭盈利呈逐年增加趋势。综合分析表明,草畜平衡技术可作为定居农牧民提高生产效益、保护生态环境的技术手段和有效措施。
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利用乙肝核心抗原展示口蹄疫病毒2C蛋白表位
《新疆农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：【目的】利用乙肝核心蛋白(Hepatitis B virus core protein,HBc)自我组装的能力将口蹄疫病毒(Footand-mouth disease virus,FMDV)非结构蛋白2C的抗原表位插入到HBc的主要免疫优势区(Major immunodominant region,MIR),使2C的表位展示在衣壳表面,鉴定其是否具有免疫反应性。【方法】人工合成筛选的2C蛋白表位序列,将其插入HBc的MIR区,构建原核表达质粒p△HBc2C,室温条件下,1m M IPTG过夜诱导表达蛋白,诱导物离心后SDS-PAGE凝胶电泳分别检测沉淀和上清是否有蛋白表达,Western-blot鉴定表达蛋白是否具有免疫反应性。【结果】SDS-PAGE和Western-blot鉴定,沉淀中25 k D处有特异性条带出现,与预期的23 k D蛋白相符,证明2C蛋白具有免疫反应性。【结论】利用HBc自我组装空衣壳的能力展示筛选的2C蛋白抗原表位具有免疫反应性。
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口蹄疫病毒反向遗传技术研究进展
《动物医学进展 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：口蹄疫(FMD)是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的一种高度接触性传染病,被世界动物卫生组织(OIE)列为必须报告的传染病之首,其暴发会严重影响畜牧业发展、人民生活以及国民经济。但目前对口蹄疫病毒的了解仍存在盲区,口蹄疫疫苗还有许多不足。病毒反向遗传学技术的飞速发展为口蹄疫病毒结构的深入研究与新型疫苗及其生物制品的研制提供了一种新的高效的技术方法。论文就国内外运用反向遗传学技术对口蹄疫病毒分子致病机理研究及利用反向遗传学操作技术研制新型FMD疫苗进行综述,并且展望口蹄疫病毒反向遗传学研究新动向。
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新疆猪繁殖与呼吸综合征病毒分离鉴定及其Nsp2和ORF5基因遗传变异分析
《广东农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为探索新疆猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的变异特征,利用RT-PCR、ORF5和部分NSP2基因序列进行分析,鉴定从新疆某猪场疑似猪高热病死亡猪肺脏分离出的一株病毒。分离的病毒株被鉴定为PRRSV美洲型,命名为XJ-Q株。该株病毒与香港分离株HK13亲缘关系最近,与国内变异株(HUB1和JXA1)同源性较为亲近。与美洲型标准毒株VR-2332相比,该分离株在481位和532~560位共有30个氨基酸缺失;与国内分离的PRRSV变异株相比,在487~489位有3个氨基酸的独特缺失。结果表明,新疆分离株为PRRSV美洲型,属于新缺失的PRRSV毒株。
关键词： 猪繁殖与呼吸道综合征病毒(PRRS) ORF5基因 Nsp2基因 序列分析
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牧压对草地植物养分和土壤理化性质的影响
《草业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：研究了不放牧、轻度放牧(1.13羊·hm-2)和重度放牧(1.95羊·hm-2)3个牧压下天山北坡草原化荒漠草地植物粗蛋白、粗脂肪、土壤容重和有机质含量的变化。结果表明:1)春季和秋季放牧后,不放牧草地的植物粗蛋白和粗脂肪含量均下降。春季放牧后,轻度和重度放牧处理的植物粗蛋白和粗脂肪含量均比春季放牧前略高,而秋季放牧后粗蛋白和粗脂肪含量均低于秋季放牧前;2)春季和秋季放牧前后,土壤容重变化均不大;春季重度放牧处理后,土壤有机质含量表现出下降趋势,且与不放牧和轻度放牧处理间差异极显著(P<0.01)。秋季放牧后,轻度和重度放牧处理各层土壤有机质含量与秋季放牧前相比略有降低。3)从植物粗蛋白和粗脂肪含量,土壤容重和有机质含量变化来看,1.13羊·hm-2轻度放牧处理是较为合理的放牧强度。
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棉籽粕固体发酵脱毒工艺参数的优化研究
《新疆农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：【目的】开发一种棉籽粕生物发酵脱毒的方法。【方法】设计正交试验以研究白地霉WD-1对棉籽粕固态发酵产物棉酚含量的影响,对发酵底物组成、底物水分含量、菌种接种量、发酵温度和发酵时间等参数进行优化。【结果】影响棉粕发酵脱毒的主要因素为发酵温度,棉籽粕发酵脱毒底物组成为棉籽饼88%、玉米粉8%、小麦麸4%,最佳发酵工艺参数为:底物∶水1∶0.9,菌液接种量4%(v/w),发酵温度30℃,发酵时间72h,自然pH值。【结论】利用白地霉WD-1对棉籽粕进行固体发酵可以降低底物中游离棉酚的含量。
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几种非营养性添加剂对育肥猪生产性能及发酵粪便中NH_3、H_2S的影响
《新疆农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：【目的】研究非营养性添加剂对育肥猪生产性能、血液生化指标和发酵粪便中NH_3、H_2S的影响。【方法】试验选取100头健康、出生日龄相近、公母各半、体重(59.95±1.25)kg相近的长×大二元杂交中猪作为试验猪。随机分成5组,即对照组、试验组一、试验组二、试验组三和试验组四,每组20只。对照组饲喂基础日粮,试验组分别在基础日粮中添加0.1%/t植酸酶、0.1%/t复合酶、0.05%/t益生素+0.05%/t寡糖和0.1%/t植酸酶+0.1%/t复合酶+0.05%/t益生素+0.05%/t寡糖,试验期42 d。在试验的第42 d采集血清和粪样,测定其血液生化指标和发酵粪便中NH_3、H_2S含量。【结果】(1)与对照组相比,试验组四和试验组三显著增加日增重(P<0.05);(2)与对照组相比,试验组三和试验组一血清总蛋白含量显著提高(P<0.05);试验组四白蛋白显著提高(P<0.05);试验组二、试验组三和试验组四碱性磷酸酶含量显著降低(P<0.05);试验组四血清钙显著提高(P<0.05);(3)与对照组相比,试验组发酵粪便的NH3含量、H_2S含量均呈下降趋势,但差异不显著(P<0.1)。【结论】非营养性添加剂可以提高育肥猪生产性能;提高血清中总蛋白、白蛋白的含量;降低碱性磷酸酶的含量,对发酵粪便中NH_3、H_2S含量有降低趋势。
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捕食线虫性真菌—少孢节丛孢菌口服生物制剂安全性试验
《西北农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为研究少孢节丛孢菌口服生物制剂的安全性,将20只6月龄绵羊分成4组,前3组分别灌服含有1.0×105、1.0×106、1.0×107少孢节丛孢菌分生孢子口服生物制剂,第4组为对照组灌服灭菌的生理盐水,灌服后连续30d观察绵羊的各项临床指标;并在7d后每组分别剖检2只绵羊,无菌采集绵羊各器官组织,进行组织切片和少孢节丛孢菌的分离鉴定;另外,将12只感染捻转血矛线虫后的绵羊分成3组,灌服3个不同剂量的生物制剂后测定其对粪便中线虫的捕食活性。结果表明,绵羊的精神状态、食欲、饮水、体温、粪便、增量正常;绵羊肝脏、脾脏、肾脏、肠道淋巴结等组织器官没有出现病理变化;也未从上述组织中分离出少孢节丛孢菌;3个不同剂量的生物制剂均可显著降低绵羊粪便中的幼虫数量。研究结果证实,少孢节丛孢菌口服生物制剂安全有效,无毒副作用。
关键词： 捕食线虫性真菌 少孢节丛孢菌 口服生物制剂 安全性
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碱胁迫下塔乌库姆冰草的萌发及生理响应
《草地学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：以塔乌库姆冰草(Agropyron cristatum‘Tawukumu')种子为材料,将NaHCO_3和Na_2CO_3碱溶液以9:1混合,设0,10,30,60,90,120 mM共6个处理浓度,采用培养皿法及盆栽法分别研究碱胁迫下种子萌发和幼苗的生理表现,为其推广及在盐碱地生产提供依据。结果表明:随着处理液浓度的升高,种子萌发率下降,萌发时间延迟;胚芽长、胚根长、种子活力指数以及叶绿素含量显著下降;丙二醛(MDA)含量上升;可溶性糖、脯氨酸和超氧化物歧化酶(SOD)含量均表现出先升高后降低的趋势。塔乌库姆冰草对碱胁迫具有一定的耐受性,在胁迫浓度≤30mM,即pH≤9.1时,萌发和生长不会受到影响;当胁迫浓度≥90 mM,即pH≥10.1时,萌发和生长会受到明显抑制。因此,碱胁迫浓度≤60 mM,即pH≤9.8是塔乌库姆冰草能够萌发和生长的最大耐碱性范围。
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