科研产出
EgM9与EGr_09888重组蛋白对细粒棘球绦虫原头蚴体外发育的影响
《动物医学进展 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:探究细粒棘球绦虫生殖相关基因EgM9和EGr_09888对细粒棘球绦虫原头蚴(PSCs)体外发育的影响。确定最适宜SDS与PSCs共培养浓度;设置2.5%和5%的蛋白共培养液加入量,Ⅰ组含20%胎牛血清(阴性对照组),Ⅱ组含0.1%SDS EgM9蛋白共培养液,Ⅲ组含0.1%SDS EGr_09888蛋白共培养液,通过RT-qPCR确定最适加入量;设置Ⅰ~Ⅲ组与体外培养7 d PSCs共培养,收集7 d、21 d的虫体,RT-qPCR、Immunoblotting分析结果。结果表明,0.1%SDS是与PSCs共培养的最适浓度,重组蛋白共培养液的加入量为5%;RT-qPCR分析表明重组蛋白EgM9和EGr_09888对虫体的相应基因均有显著性调控(P<0.01),免疫印迹分析,以EgM9鼠血清为一抗时,7 d和21 d的Ⅲ组在35.0 ku出现条带,以EGr_09888鼠血清为一抗时,在21 d时Ⅲ组在35.0 ku出现条带。研究证实EgM9、EGr_09888重组蛋白分别对细粒棘球绦虫相应基因有显著性调控,对虫体中EGr_09888相应蛋白调控作用更为显著。
关键词: 细粒棘球绦虫 原头蚴体外培养 EgM9重组蛋白 EGr_09888重组蛋白
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妊娠中后期饲粮添加乳酸钙对母羊生产性能、血清生化指标及其所产羔羊生长发育的影响
《动物营养学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:本试验旨在研究妊娠中后期饲粮添加乳酸钙对母羊生产性能、血清生化指标及其所产羔羊生长发育的影响。选取体重相近的妊娠60 d且怀有3只羔羊的健康湖羊24只,随机分为2组,每组4个重复,每个重复3只。试验从妊娠第60天开始,持续到产后第60天。在妊娠第91~120天,对照组饲喂常规不含乳酸钙的基础饲粮,试验组饲喂添加0.44%乳酸钙的试验饲粮,其他时间2组均饲喂常规饲粮。结果显示:1)与对照组相比,饲粮中添加乳酸钙极显著增加了母羊妊娠第91~150天平均日增重(P<0.01),极显著降低了母羊产后平均失重(P<0.01),显著增加了母羊妊娠第91~120天干物质采食量和产后第20天产奶量(P<0.05)。2)试验组母羊妊娠第120天血清钙离子含量显著高于妊娠第90天(P<0.05),并显著高于对照组妊娠第120天(P<0.05);试验组母羊妊娠第120天血清甲状旁腺激素含量显著低于妊娠第90天(P <0.05),并极显著低于对照组妊娠第120天(P<0.01);试验组母羊妊娠第120天血清降钙素含量显著高于妊娠第90天(P<0.05),并极显著高于对照组妊娠第120天(P<0.01)。3)对照组母羊妊娠第120天和产后第20天血清β-羟丁酸含量均极显著高于妊娠第90天(P<0.01),并显著高于同期的试验组(P<0.05);试验组母羊妊娠第120天血清尿素氮和葡萄糖含量显著高于对照组(P<0.05)。4)试验组羔羊体重、平均日增重、体尺指标以及血清生化指标均优于对照组,但差异不显著(P>0.05)。综上所述,妊娠中后期饲粮添加0.44%的乳酸钙提高了母羊的平均日增重、干物质采食量和产奶量,降低了母羊产后平均失重,增加了母羊血清钙离子、降钙素、尿素氮和葡萄糖含量,降低了母羊血清甲状旁腺激素和β-羟丁酸含量,继而对母羊产后恢复及其所产羔羊的生长发育产生了积极影响。
关键词: 乳酸钙 湖羊 母羊 羔羊 妊娠中后期 生产性能 血清生化指标
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阿勒泰羊胚胎PDGFD基因编辑研究
《畜牧兽医学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:旨在用CRISPR/Cas9技术生产阿勒泰羊血小板源生长因子D(PDGFD)基因SNP位点的基因编辑胚胎。本研究根据阿勒泰羊PDGFD基因脂尾性状相关的3个SNPs位点设计合成5个sgRNA (PDGFD-314-sgRNA2、PDGFD-314-sgRNA5、PDGFD-410-sgRNA、PDGFD-397-sgRNA2、PDGFD-397-sgRNA7),结合Cas9核酸酶进行体外活性分析。电转阿勒泰羊体外受精4~5 h的胚胎Cas9-sgRNA核糖核蛋白复合物(RNP),每组35~40枚,3次重复,培养至第7天统计囊胚率,进行基因组靶基因位点扩增及测序分析。受精卵电转PDGFD和MSTN基因(非PDGFD基因)同源重组基因编辑材料,培养至第7天统计囊胚率及进行PDGFD sgRNA脱靶效率分析。结果表明,5个sgRNA在体外均有高效的切割活性;电转受精卵的存活率和卵裂率与对照组差异均不显著(P>0.05),但电转组囊胚率显著低于对照组(P<0.05)。PDGFD-397-sgRNA2在绵羊体外胚胎中的编辑效率均高于其它sgRNAs。PDGFD-397-sgRNA2在绵羊基因组上错配1个碱基的脱靶位点有19个,覆盖在外显子区的基因有CFDP1,APOO,PCDH11X等;错配2个碱基的位点有31个,覆盖在外显子区的基因有TIMM17B、C1H1orf228和TLL1等。电转PDGFD和MSTN基因同源重组编辑材料,两组胚胎的存活率和卵裂率差异不显著(P>0.05),但前者的囊胚率显著低于后者(P<0.0 5)。本研究结果表明,阿勒泰羊PDGFD基因尾脂性状相关SNP位点的CRISPR/Cas9编辑显著降低体外胚胎的囊胚率,因此,PDGFD基因可能影响绵羊早期胚胎的发育。综上所述,PDGFD基因可能对绵羊胚胎的早期发育有着重要的作用。
关键词: 电转 CRISPR/Cas9 PDGFD 胚胎发育
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基于转录组测序揭示羊毛柔软度差异的遗传基础
《南方农业学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:[目的]基于转录组测序揭示羊毛柔软度差异的遗传基础,为优良羊毛性状的品种选育提供候选位点与理论参考.[方法]选择羊毛柔软度差异较大的细毛羊(XMY)、绵羊(MY)和山羊(SY)为试验材料,观察羊毛表型差异,并在体视显微镜下分离毛囊组织,提取总RNA进行转录组测序.利用ARMATS对各样品进行差异可变剪接事件分析,使用StringTie计算各基因外显子每千碱基片段百万比(FPKM),采用DESeq2筛选差异表达基因(DEGs)并进行GO功能富集分析.利用实时荧光定量PCR检测DEGs相对表达量.[结果]MY羊毛质地粗糙,柔软度最低,SY羊毛纤维细密,柔软度最高,XMY羊毛弹性好,纤维结构紧密,柔软度居中.SY与XMY基因表达量相关系数最低,二者差异最大.MY vs XMY组差异可变剪接事件最多,SY vs XMY组差异可变剪接事件最少.MY vs SY、MY vs XMY和SY vs XMY组的DEGs显著富集在角蛋白丝和核糖体等角蛋白合成途径上,MY vs XMY和SY vs XMY组DEGs富集程度最高的是角蛋白丝途径,MY vs SY组DEGs富集程度最高的是核糖体途径.KRT74基因在SY中的FPKM值显著高于MY(P<0.05),而EDAR基因在SY和MY中的FPKM值无显著差异(P>0.05).MY vs SY、MY vs XMY和SY vs XMY组共有65个DEGs,在NR数据库中注释到KRT2等5个角蛋白合成相关基因.候选基因LOC105604740、LOC101108536、LOC114110489和LOC101108798在MY与SY间均存在极显著差异(P<0.01).[结论]羊毛柔软度的形成是角蛋白家族基因(KRT2、KRT74)及其相关调控网络在表达水平和时空模式上的综合作用结果.基于毛囊组织转录组测序筛选出 65 个可能影响羊毛柔软度的DEGs,其中LOC105604740、LOC101108536、LOC114110489 和LOC101108798基因可用于羊毛品质的DNA分子标记开发.
关键词: 羊毛 柔软度 转录组测序 角蛋白 差异可变剪接事件
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10份紫花苜蓿种质苗期抗旱性评价
《种子 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:为探究紫花苜蓿种质苗期抗旱性,在自然干旱胁迫条件下,观测10份紫花苜蓿种质的生长趋势、测定其生理特性、分析其根系特征,利用隶属函数进行紫花苜蓿苗期抗旱能力综合评价.结果表明,干旱胁迫下,10份紫花苜蓿种质材料的株高、叶长、叶片数、根冠比及丙二醛含量与对照相比显著降低;抗氧化酶活性、ABA含量、脯氨酸含量及可溶性糖含量与对照相比显著升高,M-70、M-98及M-104的可溶性蛋白含量较对照有所上升,其他7份种质材料可溶性蛋白含量较对照组有所下降;M-83的根长、根表面积、根体积、根尖数和M-70的根表面积与对照相比有所上升,其他材料的根长、根表面积、根体积、根尖数与对照相比均有所下降.通过隶属函数结论结合聚类分析,可以将10份紫花苜蓿种质材料的抗旱性划分为强、一般、弱3类,其中,抗旱能力较强的有M-104、M-98和M-83,抗旱能力一般的是M-70,而M-107、M-39、M-96、M-33、M-108和M-93抗旱能力相对较弱.M-104、M-98和M-83这3份种质材料在抗旱性方面有深入挖掘价值,也是培育紫花苜蓿抗旱新品种(系)很好的潜在亲本材料.
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乳酸钙对妊娠中后期母羊血清抗氧化指标、营养物质表观消化率、瘤胃发酵参数和微生物多样性的影响
《动物营养学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:本试验旨在研究妊娠中后期母羊饲粮中添加乳酸钙对其血清抗氧化指标、营养物质表观消化率、瘤胃发酵参数和微生物多样性的影响。选取体重[(51.57±2.38) kg]相近的妊娠60 d且怀有3只羔羊的健康湖羊24只,随机分为2组,即对照组(CK组)和乳酸钙组(CL组),每组4个重复,每个重复3只。试验从妊娠第60天开始,持续到产后第20天。在妊娠第91~120天,CK组饲喂不含乳酸钙的常规基础饲粮,CL组饲喂添加0.44%乳酸钙的试验饲粮,其他时间2组均饲喂常规基础饲粮。结果显示:1)与CK组相比,CL组母羊妊娠第120天血清总抗氧化能力和超氧化物歧化酶活性显著增加(P<0.05),血清谷胱甘肽过氧化物酶活性极显著增加(P<0.01),血清丙二醛含量显著降低(P<0.05)。2)与CK组相比,CL组钙、磷、粗蛋白质和中性洗涤纤维表观消化率显著增加(P<0.05)。3)与CK组相比,CL组母羊妊娠第120天瘤胃液pH、氨态氮含量和乙酸/丙酸值显著降低(P<0.05),微生物蛋白、乙酸、丙酸和总挥发性脂肪酸含量显著增加(P<0.05)。4)与CK组相比,CL组瘤胃细菌的Chao1和Shannon指数显著增加(P<0.05),髌骨细菌门、纤维杆菌门、理研菌科RC9肠道群、未分类F082、假丝酵母菌属和普雷沃氏菌科UCG-001相对丰度显著增加(P<0.05),未分类梭菌纲UCG-014相对丰度极显著增加(P<0.01)。综上所述,妊娠中后期补饲乳酸钙提高了母羊的抗氧化能力和瘤胃对氨态氮的利用能力,增加了钙、磷、粗蛋白质和中性洗涤纤维表观消化率,促进瘤胃中挥发性脂肪酸和微生物蛋白的合成,这些改变可能与乳酸钙改善了妊娠中后期母羊瘤胃发酵模式和增加某些微生物的相对丰度有关。
关键词: 乳酸钙 湖羊 母羊 妊娠中后期 表观消化率 瘤胃发酵参数 微生物多样性
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红三叶草异黄酮含量影响因素与提取条件优化
《动物营养学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:本试验旨在探究红三叶草异黄酮含量的影响因素及最佳的热回流提取条件.通过选取4个不同品种红三叶草,分别对其叶部和茎部的异黄酮含量进行测定,以确定品种和植株部位对异黄酮含量的影响.采用Box-Behnken设计3因素3水平的响应面试验,以料液比、提取温度和提取时间为影响因素,红三叶草异黄酮得率作为考察依据,采用80%乙醇作为萃取溶剂,确定最佳的提取条件.结果表明:1)Xuanli品种红三叶草总异黄酮含量最高,为5.92 g/kg DM,显著高于其他3个品种(P<0.05);红三叶草叶部总异黄酮含量和质量百分比均显著高于茎部(P<0.05).2)最佳提取条件为料液比1∶18(g∶mL)、提取温度90 ℃、提取时间1 h,此时异黄酮得率为93.71%.由此可知,红三叶草品种显著影响异黄酮含量,叶部异黄酮富集程度高于茎部.本试验成功筛选出了红三叶草异黄酮的最佳提取条件,为工业生产红三叶草异黄酮提供了有效数据支撑.
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复杂场景下基于改进YOLOv11的羊爬跨行为识别研究
《中国农业科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:【目的】羊爬跨行为是反映母羊发情状态的重要行为学指标之一,在种羊繁殖管理与发情监测中具有重要意义。传统人工监测方法存在主观性强、效率低、漏检率高等问题,难以满足大规模智慧养殖的需求。为解决复杂环境下羊只爬跨行为识别困难、图像光照变化剧烈、个体遮挡重叠等挑战,拟构建一种具备高精度与强鲁棒性的自动识别模型,实现爬跨行为的快速检测与精准定位,为智能化羊群繁殖管理提供技术支撑。【方法】采集山东省嘉祥种羊场2024年4月15日至5月15日期间24只母羊在圈舍内日常活动视频数据,通过人工标注获取爬跨与非爬跨行为样本图像共4 700张,构建平衡行为识别数据集。在YOLOv11模型基础上,提出改进型SIDS-YOLOv11检测模型,分别引入SCINet低光照图像增强模块提升低光照图像质量,iAFF特征融合模块优化多尺度语义信息表达,DySample动态上采样机制增强边缘细节恢复能力,以及SEAM空间注意力机制提升遮挡目标辨识度。训练过程中采用CIoU损失函数进行边框回归优化,辅以多种数据增强策略提升模型鲁棒性与泛化能力。【结果】改进模型SIDS-YOLOv11在验证集上取得mAP@0.5值为0.942,Precision为0.956,Recall为0.854,mAP@0.5-0.95为0.703,分别较YOLOv11原始模型提升3.5%、4.7%、1.7%和1.5%。热力图可视化结果表明,改进模型在低光照和遮挡场景下仍能准确关注目标区域,模型改进后的热力图更加集中,减少了背景噪声干扰,特征提取能力逐步增强,显著提升了识别准确率与定位稳定性。对比YOLOv8n、YOLOv6、Faster R-CNN与SSD等主流目标检测算法,SIDS-YOLOv11在精度与推理速度之间取得更优平衡,通过对低光照、高遮挡视频的测试,进一步验证了SIDS-YOLOv11在复杂场景下羊爬跨行为检测任务的性能优势,且在复杂场景下保持63%以上检测精度,表现出良好的实用性与适应性。【结论】SIDS-YOLOv11模型有效融合图像增强、特征表达与注意力机制,显著提升了复杂环境下羊爬跨行为的识别能力。其在遮挡重叠、低光照等不利条件下依然具备稳定的检测性能,可为智慧羊场中发情监测、行为分析与繁殖管理提供高效的视觉识别解决方案,具有良好的推广应用价值。
关键词: 羊爬跨行为 SIDS-YOLOv11 行为检测 发情监测 复杂场景
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解木聚糖科恩氏菌固态发酵棉秆条件优化、营养价值评定及其瘤胃发酵特性
《草业科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:利用解木聚糖科恩氏菌(Cohnella xylanilytica sp. strain T5)固态发酵棉秆,以真蛋白(TP)含量为效应指标,进行单因素试验和六因素三水平L9(3~4)正交试验设计优化发酵条件,以期筛选出最适发酵条件。设置对照组(不进行发酵处理)和发酵组(最适发酵条件进行发酵处理),比较发酵前后营养成分、霉菌毒素和游离棉酚含量的变化。利用体外产气法进行72 h体外发酵试验,比较对照组和发酵组的产气量、pH、挥发性脂肪酸和氨态氮浓度的变化。结果表明:1)棉秆最适发酵条件为发酵温度30℃、发酵时间8 d、料水比1:0.9、种子液添加量25%(6.20×10~6 cfu·g-1)、玉米粉添加比例15%、尿素添加比例2%。2)最适发酵条件下,发酵组的TP和粗蛋白含量分别显著增加了111.96%和19.44%(P<0.05),中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量均显著降低(P<0.05)。游离棉酚含量显著降低了13.73%(P<0.05),玉米赤酶烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇和黄曲霉毒素B1均低于我国《饲料卫生标准》。3)体外发酵试验表明,发酵组的氨态氮、微生物蛋白和挥发性脂肪酸浓度均显著增加(P<0.05)。综上,发酵后的棉秆营养成分显著改善,霉菌毒素处于国标限量规定范围内,且有利于促进瘤胃发酵。
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全基因组选择信号筛选和田羊异质被毛相关候选基因
《新疆农业科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:【目的】被毛类型是绵羊重要的品种特征之一,但是其形成的分子基础目前仍不清楚。筛选出与和田羊异质被毛有关的基因和通路,为进一步解析和田羊异质被毛的分子调控机制提供理论依据。【方法】对异质被毛和田羊和同质被毛中国美利奴羊的基因组信息进行选择信号分析,研究筛选出与和田羊被毛类型相关的候选基因。选取健康和田羊和中国美利奴羊成年母羊各15只,颈静脉采血,提取基因组DNA进行基因组重测序,基于全基因SNPs进行选择信号检测分析。将Fst和θπRatio的top1%作为阈值,筛选出SNPs位点进行注释,并对注释基因进行GO功能和KEGG通路富集分析,确定与和田羊异质被毛性状相关的候选基因和生物学通路。【结果】Fst和θπRatio两种方法共鉴别出732个受选择基因,这些基因被显著富集到多个与羊毛性状有关的KEGG通路和1条与毛囊发育有关的生物学过程通路。【结论】筛选出多个羊毛性状有关的通路和5个(BMPR2、LPAR6、RARA、CDC6和BNC1)可能与和田羊异质被毛相关的关键候选基因。
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