科研产出
粪菌移植治疗犊牛无特异病原性腹泻和细菌性腹泻的疗效及其肠道菌群变化
《畜牧兽医学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：旨在比较粪菌移植(Fecal microbiota transplantation, FMT)治疗犊牛无特异病原性腹泻和细菌性腹泻的疗效和肠道菌群变化。选择8头健康新生犊牛作为健康对照组(Health, H),再选择具有临床腹泻症状的新生犊牛24头，经腹泻相关病原检测，16头无腹泻相关病原感染的腹泻犊牛分为无特异病原腹泻组(Diarrhea, D),8头感染产志贺毒素大肠埃希菌(Shiga toxin-producing E.coli,STEC)的腹泻犊牛作为STEC腹泻组(STEC-Diarrhea, SD)。各组犊牛平均日龄为(14.8±6.1)d。通过腹泻病原和腹泻症状筛查选择供体犊牛并制备粪菌液，口服粪菌液(每头250 mL,含40 g单一供体粪便)治疗腹泻犊牛，根据布里斯托粪便分型法(Bristol Stool Scale, BSS)评估治疗有效性。治疗后D组犊牛命名为无特异病原腹泻治疗组(FMT-D),SD组犊牛为STEC腹泻治疗组(FMT-SD)。记录治愈天数和日增重，测定犊牛生理常值、血常规、细胞因子及免疫球蛋白。采集各组犊牛直肠粪便进行16S rRNA基因测序，分析其肠道菌群变化。结果显示，经FMT治疗，D组和SD组犊牛的布里斯托粪便分型分别从6～7型极显著下降为4～5型(P<0.000 1),下降后的分型值与H组无差异(P>0.05)。FMT-D组和FMT-SD组的平均治愈天数(4.9和4.4)无显著差异(P>0.05)。治疗后150 d, FMT-D组的犊牛日增重与H组无显著差异(P>0.05),而FMT-SD组的日增重显著低于H组(P<0.05)。D组和SD组犊牛血液IL-1β、IL-6和IL-10浓度极显著高于H组(P<0.01),经FMT治疗后均下降至H组水平。D组和SD组犊牛粪便中分泌型免疫球蛋白A极显著低于H组(P<0.001),且D组IL-22显著低于H组(P<0.05),经FMT治疗后均上升，与H组水平无差异(P>0.05)。D组和SD组犊牛肠道菌群的丰富度和多样性均显著低于H组(P<0.05),经FMT治疗后上升至H组水平。D组和SD组犊牛肠道菌群结构β多样性与H组差异极显著(P<0.001),梭杆菌门的相对丰度均极显著高于H组(P<0.001),志贺菌属、Tyzzerella和栖粪杆菌属、[Ruminococcus]＿gnavus＿group、丁酸球菌属和柯林斯氏菌属、梭杆菌属相对丰度显著高于H组(P<0.05),经过FMT治疗，上述菌门和菌属相对丰度均下降至H组水平。而D组和SD组犊牛的Muribaculaceae、Rikenellaceae＿RC9＿gut＿group、[Eubacterium]＿coprostanoligenes＿group、鼠肠单胞菌属、Clostridia＿UCG＿014、Subdoligranulum和布雷兹纳克氏菌属相对丰度极显著低于H组(P<0.01)。经过FMT治疗，上述菌属的相对丰度均上升且与H组无显著差异(P>0.05)。本研究表明，FMT对无特异病原性腹泻和细菌性的犊牛腹泻均有显著治疗效果。FMT治疗显著降低了腹泻犊牛肠道菌群中具有致病性菌属的相对丰度，同时增加了潜在益生菌属的相对丰度，肠道菌群的组成结构趋向健康，犊牛免疫功能显著增强。FMT治疗可能对犊牛的增重和生长产生长期有益影响。但FMT对这两种腹泻犊牛肠道菌群的恢复过程中存在一定差异。
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牛冠状病毒N蛋白的原核表达及对小鼠免疫原性的初步评价
《中国兽医学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：牛冠状病毒（bovine coronavirus, BCoV）可引起新生犊牛腹泻和呼吸道疾病，严重时可导致犊牛死亡，给养牛业造成巨大的经济损失。目前我国尚未有自主研发的针对BCoV的疫苗，导致BCoV流行性高、传播范围广，因此开发具有保护性BCoV的疫苗是当务之急。本研究旨在表达BCoV N蛋白并分析其免疫原性，首先用PCR方法扩增N蛋白基因，构建pET-30a-N重组质粒，表达并纯化N蛋白，再将N蛋白与佐剂配伍免疫小鼠；采用间接ELISA检测小鼠IgG和IgA抗体水平及滴度，利用流式细胞术检测小鼠脾脏T淋巴细胞分群比例以及相关免疫细胞因子的释放情况。结果显示，成功获得BCoV可溶性N蛋白，大小约为55 kDa; ELISA检测结果显示，免疫组小鼠血清IgG抗体效价为1∶51 200,免疫组小鼠血清IgA抗体效价为1∶3 200;流式细胞术检测结果显示，与对照组相比，免疫组CD4+/CD8+ T淋巴细胞亚群比例极显著升高（P<0.01）,TNF-α释放显著增多（P<0.05）,产生偏向辅助性T细胞增加和TNF-α分泌增多的细胞免疫应答。研究表明，通过原核表达系统能成功实现BCoV N蛋白的可溶性表达，且获得的BCoV N蛋白免疫原性良好，可诱导免疫小鼠产生强烈的体液免疫和细胞免疫反应。为开发安全有效的BCoV亚单位疫苗提供了重要的技术支持。
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基于状态向量增强ByteTrack的新生羔羊活动量自动计算方法
《农业工程学报 》 2024 EI 北大核心 CSCD
摘要：为评价母羊繁殖性能并及时发现分娩栏中的弱活力羔羊，该研究提出一种基于状态向量增强ByteTrack的新生羔羊活动量自动计算方法。针对传统ByteTrack算法在跟踪目标被遮挡时易发生身份切换的问题，引入置信度信息增强的状态向量，提高跟踪算法区分遮挡与被遮挡羔羊的能力。针对跟踪目标丢失导致轨迹预测不准确的问题，构建目标丢失期间的虚拟轨迹并重更新轨迹状态向量，以纠正轨迹误差。在获取各羔羊活动轨迹后，计算各羔羊帧间移动距离统计羔羊活动量。在江苏海门山羊研发中心采集的新生羔羊活动视频数据集上，测试状态向量增强的ByteTrack多目标跟踪算法性能。测试结果表明，研究提出的多目标跟踪方法在高阶跟踪精度、多目标跟踪精度、多目标跟踪准确度、IDF1得分上分别达到80.8%、86.1%、84.5%和92.2%，相较于现有算法的最高精度，分别提高2.7、0.2、2.3和3.9个百分点。该研究所提方法能够实现同窝多只新生羔羊的稳定跟踪，为新生羔羊活动量的自动计算、母羊繁殖性能的自动评估提供技术支撑。
关键词： 动物 目标检测 多目标跟踪 数据关联 遮挡 羔羊活动量
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4种菊花茎叶营养成分分析及体外降解效果评价
《中国畜牧杂志 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：试验旨在利用体外发酵法评定 4 种菊花茎叶的饲用价值并筛选出适宜在南疆地区推广的非常规饲料.采集黑心菊、万寿菊、百日菊、雏菊的茎叶,首先通过化学分析法测定 4 组菊花茎叶的营养成分,评估其相对饲用价值,然后采集多浪羊的瘤胃液,利用体外瘤胃发酵法进行体外瘤胃发酵试验,测定发酵72 h的产气量、产气动力学参数、瘤胃发酵特性指标.结果表明:万寿菊茎叶的粗蛋白质含量高于其他3种菊花茎叶(P<0.05),黑心菊和百日菊茎叶的中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量高于雏菊和万寿菊茎叶(P<0.05);万寿菊茎叶的干物质采食量、粗饲料分级指数、饲料相对值高于其他 3 种菊花茎叶(P<0.05),万寿菊与雏菊茎叶的产奶净能、可消化干物质高于百日菊与黑心菊茎叶(P<0.05);4 种菊花茎叶的 72 h产气量由高到低为万寿菊、雏菊、百日菊、黑心菊,万寿菊与百日菊茎叶的快速产气量高于黑心菊及雏菊茎叶(P<0.05),万寿菊与雏菊茎叶的慢速产气量高于百日菊与黑心菊(P<0.05);雏菊茎叶的pH、氨态氮含量高于百日菊与黑心菊茎叶(P<0.05),万寿菊茎叶的干物质降解率高于其他 3 种菊花茎叶(P<0.05).由此可见,4 种菊花茎叶的相对饲用价值、体外产气量、体外发酵特性存在差异,其中万寿菊茎叶营养价值更高、体外发酵特性更好,饲料利用价值更突出.
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陆地棉正反交F2∶3家系主要农艺性状与单株皮棉产量的关系
《新疆农业科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】研究棉花单株产量与主要农艺性状之间的关系，为丰富棉花育种的基础材料和培育优良杂交种提供依据。【方法】以陆地棉徐州142和系9的正反交组配合衍生的90和78份F2∶3家系，采用相关性分析、主成分分析、回归分析和通径分析等方法，研究组合的株高、果枝数、有效果枝数、铃数、有效铃数、单铃重和衣分等指标和棉花单株皮棉产量的关系。【结果】F2∶3家系具有丰富的变异，大部分性状表现出典型数量遗传特点，普遍存在超亲分离现象，各个性状的杂种优势表现明显。单株籽棉产量和单株皮棉产量与株高、果枝数、有效果枝数、铃数、有效铃数和单铃重间均呈极显著正相关。提取了两类主成分，PC1代表棉铃生长因子；PC2代表衣分和铃重综合选择因子。有效铃数直接通径系数最大，对棉花单株产量贡献最大。【结论】有效铃数对棉花产量贡献最大，选择有效铃数多的棉花品种是高产品种选育重要途径，但也要考虑单铃重、衣分和有效果枝数，有利于培育棉花新杂交系。
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犊牛腹泻症的病原学检测及鉴定
《新疆农业科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】研究新疆某规模化牛场犊牛腹泻症的主要病原。【方法】采用RT-PCR方法，检测14份腹泻犊牛粪便中的病毒，对4头死亡犊牛肝组织进行细菌分离培养及鉴定、小鼠致病性和药物敏感性试验。将分离的致病菌扩增16S rDNA基因片段并测序，并将其结果在NCBI中用BLAST搜索同源序列，分析遗传进化特性。【结果】该牛场犊牛腹泻的病原为牛冠状病毒(Bovine coronavirus, BCoV)、牛轮状病毒(Bovine rotavirus, BRV)、大肠埃希氏杆菌(Escherichia coli,E.coli)和肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae,K.pneumoniae)。14份粪便中，BCoV检出率为64.29%,BRV检出率为50.00%;4份肝组织中，E.coli检出率为100.00%,K.pneumoniae检出率为50.00%。分离的2种致病菌E.coli和K.pneumoniae对阿米卡星敏感，对其它16种抗生素均耐药。【结论】该牛场引起犊牛腹泻的主要病原为BCoV、BRV、E.coli和K.pneumoniae,存在病毒与细菌的混合感染。选择阿米卡星药物防治E.coli和K.pneumoniae。
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新疆昌吉15个引进饲用燕麦品种的生产性能综合评价
《草地学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为了筛选出适宜新疆昌吉种植的饲用燕麦（Avena sativa）品种，助力该地区畜牧业可持续发展，本研究通过田间试验对15个引进的饲用燕麦品种的生产性能进行了2年的测定，并应用灰色关联法对不同品种燕麦的产量、营养品质及饲喂价值等11个指标进行了综合评价。结果表明，灌溉条件下15个燕麦品种从播种至刈割（乳熟期）需56～77 d;灰色关联度综合排名前5的品种依次为：‘甜燕1号’（0.730 7）、‘青牧3号’（0.711 5）、‘草莜1号’（0.674 6）、‘白燕3号’（0.667 9）、‘坝燕4号’（0.652 7）;年均干草产量在12 000 kg·hm-2以上的为：‘甜燕1号’(12 096.96 kg·hm-2)和‘青牧3号’(12 143.17 kg·hm-2);相对饲草质量（Relative feed quality, RFQ）值在140以上的为：‘青牧3号’（148.63）、‘甜燕1号’（147.95）、‘草莜1号’（143.62）、‘甜燕70’（140.34）;倒伏率30%以上的品种为：‘青牧3号’（36.25%）、‘甜燕70’（32.50%）、‘白燕3号’（32.50%）。结合品种的干草产量、品质及倒伏率，综合评价认为‘甜燕1号’‘草莜1号’和‘坝燕4号’适宜在本地区推广种植。
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天山北坡平原荒漠灌区9个紫花苜蓿品种生产性能综合评价
《草原与草坪 》 2024 CSCD
摘要：【目的】筛选出适宜在天山北坡平原荒漠区推广种植的紫花苜蓿品种。【方法】采用单因素随机区组设计，测定9个紫花苜蓿品种的株高、草产量、品质等指标，并利用灰色关联法对9个品种进行综合评价。【结果】随种植年限增加，供试材料的鲜草和干草产量均呈下降趋势，其中第1年的干草产量占比较高，平均为37.77%；佰苜341的株高积累量最大，为939.8 cm，显著高于其他品种；骑士T干草总产量、粗蛋白含量和相对饲喂价值最高，分别为61 602.03 kg/hm2、16.83%和119.16%；灰色关联度综合评价结果由高到低的顺序为：骑士T>佰苜202>大银河>阿迪娜>佰苜341>佰苜371>挑战者>佰苜401>康赛。【结论】骑士T的综合表现较好，建议在天山北坡平原荒漠灌区引种种植。
关键词： 紫花苜蓿 草产量 营养价值 灰色关联分析 综合评价
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山羊环鸟苷酸-腺苷酸合成酶的原核表达及其酶活性分析
《中国兽医科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为了研究山羊环鸟苷酸-腺苷酸合成酶（gcGAS）的生物学功能，通过构建含gcGAS基因的pET28a-gcGAS原核表达载体，在Rosetta (DE3)表达菌中进行表达，经纯化获得了纯度较高的重组gcGAS蛋白，并测定其酶促活性。结果显示，在优化表达条件下，实现了重组gcGAS蛋白的可溶性表达，其能以ATP和GTP为底物合成了第二信使分子2′3′-c GAMP。结论：原核表达的可溶性重组gcGAS蛋白具有生物酶催化活性，这为后续gcGAS介导的抗病毒天然免疫机制研究及其应用开发奠定了一定的基础。
关键词： 环鸟苷酸-腺苷酸合成酶 环鸟苷酸-腺苷酸 原核表达 蛋白纯化 酶活性
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体内干扰Zfy基因对驴精子发育相关基因表达的影响
《新疆农业科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】研究体内干扰Zfy基因对驴睾丸、附睾组织中Zfy蛋白表达以及精子发育相关基因表达的影响。【方法】选取健康种公驴，将一侧睾丸注射空载体作为对照组，另一侧睾丸注射Zfy干扰载体作为干扰组。采集睾丸、附睾组织，分别制作冰冻切片、固定液中固定及液氮中保存。使用冰冻切片观察载体绿色荧光蛋白在组织中的表达情况。使用免疫组化和HE染色观察干扰组和对照组Zfy蛋白表达情况。通过RT-qPCR检测干扰Zfy基因对睾丸、附睾中精子生成相关基因SYCP3、STRA8、TNP2、FAS表达水平的影响。【结果】绿色荧光蛋白主要在驴曲细精管中的圆形精子细胞和部分长形精子细胞中表达，干扰载体成功转入；干扰组驴睾丸Zfy蛋白表达量显著下调；干扰Zfy基因使驴睾丸中SYCP3基因表达量显著下调、附睾中TNP2和FAS基因表达量显著下调、而睾丸和附睾中STRA8基因表达量没有明显差异。【结论】驴Zfy基因主要在驴圆形精子中表达，干扰Zfy基因可显著抑制驴睾丸中Zfy蛋白表达、SYCP3基因表达和附睾中TNP2、FAS基因表达。
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