牛早期胚胎性别鉴定体系的建立和优化

陈从英; 黄路生; 陈静波; 丁能水; 周利华; 肖海霞; 《农业生物技术学报 》 2003 CSCD

摘要：根据牛SRY基因5'调控区序列设计合成了2对巢式PCR引物作为公牛特异的性别鉴定引物,根据牛酪蛋白基因序列设计合成了1对引物作为内标基因引物,建立了牛早期胚胎性别鉴定的PCR反应体系,同时对微量牛胚胎细胞DNA的提取方法、巢式PCR和常规PCR的灵敏度进行实验,以便建立适合在生产实践中应用的牛胚胎性别鉴定技术。结果表明,设计使用的性别鉴定引物公牛特异,所有引物牛特异。煮沸法和反复冻融法都可应用于微量牛胚胎细胞DNA的提取。实验所使用的巢式PCR只要10个以上细胞就可看到扩增结果,适合在胚胎性别鉴定中使用。在建立了胚胎性别鉴定的PCR反应体系后,鉴定了10枚奶牛胚胎的性别,目前已产下两头犊牛,其实际性别和鉴定结果相一致。

关键词： 牛 SRY基因 性别鉴定 胚胎

 全文链接 请求原文

结核分枝杆菌ESAT-6 DNA疫苗的细胞和体液应答及保护效率研究

蔡宏; 田霞; 呼西旦; 李淑霞; 朱玉贤; 《中国预防兽医学报 》 2003 北大核心 CSCD

摘要：构建了含分枝杆菌抗原ESAT_6( 6kDa)分泌蛋白 (结构基因 )的真核表达载体pJW43 0 3 ,进行了酶切鉴定和序列分析 ,确定含有正确的读码框。用脂质体介导法将重组表达质粒导入COS7细胞内并瞬时表达 ,收集表达细胞或浓缩上清液 ,进行SDS_PAGE电泳 ,用结核杆菌特异性抗体进行免疫印迹检测 ,证明上述重组质粒能在哺乳动物细胞中表达出特异蛋白。重组表达质粒肌注免疫小鼠 ,首免后 2 1d,未检测到特异性抗体 ,二免和三免 2 1d后ESAT_6的特异性抗体平均效价分别为 1∶40 0和 1∶80 0。三免后 2 1dESAT_6的特异性细胞因子γ_干扰素的浓度为 1 2 .8± 0 .4ng/mL,而阴性对照空载体DNA组三免后只诱导产生 <0 .1ng/mL的γ_干扰素。三免后经静脉强毒攻击 ,免疫组小鼠肺脏的细菌数比对照空载体组减少了 90 %以上。本研究表明 ,该核酸疫苗能同时诱导机体产生细胞和体液免疫应答并获得较高的保护效率。

关键词： 结核分枝杆菌 ESAT-6分泌蛋白抗原 ESAT-6DNA疫苗 免疫原性 保护

 全文链接 请求原文

羊BLG基因5′和3′调控区克隆及其调控GFP基因在乳腺细胞的表达

刘明军; 李文蓉; 武坚; 黄俊成; 郭志勤; 曲新勇; Paul Kroon; 《生物工程学报 》 2002 北大核心 CSCD

关键词： 羊乳球蛋白 基因克隆 绿色荧光蛋白 乳腺细胞系 表达

 全文链接 请求原文

鸡传染性法氏囊病模拟抗原苗免疫作用的探讨

钟旗; 何倩倪; 玛依拉; 张婕; 王学辉; 康吉克孜; 《中国预防兽医学报 》 2002 北大核心 CSCD

摘要：用鸡传染性法氏囊病毒 (IBDV)免疫雏鸡 ,纯化其IgG(Ab1)免疫兔制备Ab2 ,Ab2 经正常鸡IgG(NC_IgG)和IBD抗原(Ag)吸收后 ,加佐剂免疫雏鸡 ,免疫保护指数 :Ab2 组分别为 :10 0 %、10 0 %、90 % ;对照组 :0 %。重复实验 :5 0只雏鸡接种 3次Ab2 免疫 ,能抵抗IBD强毒攻击 ,该试验证实 :IBD模拟抗原苗在IBD免疫中的应用价值

关键词： 鸡传染性法氏囊病 抗独特型抗体 免疫保护

 全文链接 请求原文

新疆荒漠草地退化与治理建设方略

赵万羽; 《中国草地 》 2002 CSCD

摘要：从生态系统原理出发 ,分析新疆荒漠草地环境资源恶化现状 ,指出荒漠草地治理建设的首要任务是构筑荒漠生态安全 ,而核心是水资源的合理分配供应。主要技术措施是建植高效人工草地、治理改良与封育保护天然草地、推进牲畜舍饲利用方式 ,而以水为先导进行适度牧业土地开发高效建设 ,可逐步减少荒漠草地放牧 ,实现由天然草地放牧向人工草地舍饲的生态置换。

关键词： 荒漠草地 治理 水环境 生态

 全文链接 请求原文

新疆草地资源的劣化、原因及治理对策

赵万羽; 《草业科学 》 2002 CSCD

摘要：对新疆草地水、土、生物环境等现状分析及人类活动对草地的影响分析结果表明,草地环境资源状况恶化,沙化、盐碱化加剧,草地退化严重。绿洲区过量截流引水改变了地表水和地下水的地域分布,是导致平原区草地(特别是近水源区域)资源急剧恶化的主要原因。长期严重超载过牧,是引起整个草地全方位退化的持续因素。人为的砍挖、人类过度的垦荒,特别是不科学的水土开发造成垦殖地的大量撂荒,又加剧草地区域生态环境恶化。

关键词： 草地 环境 生态演变

 全文链接 请求原文

细粒棘球绦虫cDNA克隆EgA31在大肠埃希氏菌M15中的表达及重组蛋白的纯化和复性

傅玉才; 王进成; 张壮志; 李雄; Anne Francoise Petavy; Georges Bosquet; 《中国兽医科技 》 2002 北大核心 CSCD

摘要：为了获得细粒棘球绦虫 66ku抗原的重组蛋白和抗血清 ,用该抗原的cDNA克隆EgA3 1构建了pQE3 0EgA3 1重组质粒 ,在大肠埃希氏菌M15中表达 ,经亲和层析获得纯度较高的EgA3 1重组蛋白 ;用经复性处理的重组蛋白免疫动物 ,获得EgA3 1重组蛋白抗血清。本文就重组蛋白的稳定性和在复性处理中遇到的问题进行了讨论。

关键词： 细粒棘球绦虫 抗原 重组蛋白

 全文链接 请求原文

“新多”青贮玉米在新疆喀什地区复播种植适应性的研究

郭选政; 李柱; 雷志刚; 买买提·吐尔逊; 《中国草地 》 2002 CSCD

摘要：在新疆喀什地区复播种植新品种”新多”青贮玉米 ,对其物候期、生长速度、茎叶穗、鲜草产量以及通过对其不同播种期、不同种植密度和“新多”青贮玉米与“京早 8号”玉米产量比较等 3个实验进行了综合分析。结果表明 :“新多”系列青贮玉米在南疆喀什地区的气候条件下复播种植后 ,适应性很强 ,各种性状与当地主栽品种“京早 8号”玉米相比均表现优良。

关键词： “新多”青贮玉米 喀什地区 复播种植 适应性

 全文链接 请求原文

细胞因子对绵羊体外受精胚胎发育的影响

雷蕾; 张富春; 张家新; 钟喆; 张大铭; 郭志勤; 《畜牧兽医学报 》 2002 北大核心 CSCD

摘要：绵羊卵巢采自乌鲁木齐市屠宰场 ,卵母细胞体外成熟 2 4～ 2 5h后 ,由体外获能的附睾精子授精 ,5 0h后 ,将卵裂至 2 - 8细胞的绵羊胚胎移入添加了不同浓度细胞因子的培养液中继续培养 ,结果表明 ,加入 5、10、15 μg/ml胰岛素 (Insulin)分别得到 17 46 %、2 3 81%、2 2 95 %的囊胚率 ,与对照组 9 5 2 %相比差异显著 (P <0 0 5 )。高浓度(5 0 0 μg/ml)的粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 (Granulocyte -macrophagecolonystimulatingfactor,GM -CSF)可获得2 1 82 %的囊胚率 ,与对照组 7 2 7%相比差异显著 (P <0 0 5 )。胚胎培养液中分别加入 10、10 0、5 0 0ng/ml的白细胞介素 - 3(Interleukin - 3,IL - 3)、白细胞介素 - 8(IL - 8)和神经生长因子 (Nucleargrowthfactor,NGF)与对照组相比 ,囊胚率差异不显著。本研究表明 ,胰岛素、GM -CSF对绵羊体外受精胚胎早期发育有促进作用 ,IL - 3、IL -8、NGF对绵羊胚胎的早期发育无明显作用。

关键词： 细胞因子 绵羊 体外受精 胚胎发育

 全文链接 请求原文

东方山羊豆引种研究初报

张清斌; 杨志忠; 贾纳提; 顾祥; 孟辉; 刘万胜; 《中国草地 》 2001 CSCD

摘要：1999年 1月从哈萨克斯坦共和国引进多年生优良豆科牧草东方山羊豆分别在不同地点进行了多点试种 ,并对其播种密度、播种深度、产草量、单株种子平均产量、营养成分、适口性进行了研究。

关键词： 东方山羊豆

 全文链接 请求原文