科研产出
结核分枝杆菌四联核酸疫苗免疫原性和保护效率
《中国科学(C辑:生命科学) 》 2003 北大核心 CSCD
摘要:对结核杆菌四联DNA疫苗的免疫应答和保护效果进行了评价。用结核分枝杆菌Ag85B,MPT-64,MPT-63和ESAT-6等4个分泌蛋白基因的表达载体首次免疫小鼠21d后,Ag85B抗体滴度达到1:200,二次免疫后为1:102400,三次免疫后为1:1288。MPT-64和MPT-63的抗体滴度在首次免疫21d后即高达1:25600,二、三次免疫后呈下降趋势。三次免疫21d后均未检测到ESAT-6的特异性抗体。用该DNA四联苗免疫小鼠后,4种蛋白都诱导脾脏细胞产生较高水平的细胞应答(产生了特异性γ-干扰素)。三次免疫后经静脉强毒攻击,四联苗免疫组小鼠肺脏的细菌数比对照空载体组减少了99.8%,保护水平显著高于BCG疫苗组、对肺组织的病理形态特征观察表明,空载体pJW4303的对照小鼠,肺部严重损伤,肺实质干酪样坏死,坏死结节占肺实质的50%~70%,而四联苗免疫的小鼠,肺组织结构正常,实质无肉芽肿,肺泡轮廓清晰。研究证实,Ag85B,MPT-64,MPT-63和ESAT-6四种分泌蛋白编码基因组成的四联DNA疫苗具有很高的免疫应答水平和保护效率。
关键词: 结核分枝杆菌 分泌蛋白抗原 四联核酸疫苗 免疫原性 保护效率
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牛早期胚胎性别鉴定体系的建立和优化
《农业生物技术学报 》 2003 CSCD
摘要:根据牛SRY基因5'调控区序列设计合成了2对巢式PCR引物作为公牛特异的性别鉴定引物,根据牛酪蛋白基因序列设计合成了1对引物作为内标基因引物,建立了牛早期胚胎性别鉴定的PCR反应体系,同时对微量牛胚胎细胞DNA的提取方法、巢式PCR和常规PCR的灵敏度进行实验,以便建立适合在生产实践中应用的牛胚胎性别鉴定技术。结果表明,设计使用的性别鉴定引物公牛特异,所有引物牛特异。煮沸法和反复冻融法都可应用于微量牛胚胎细胞DNA的提取。实验所使用的巢式PCR只要10个以上细胞就可看到扩增结果,适合在胚胎性别鉴定中使用。在建立了胚胎性别鉴定的PCR反应体系后,鉴定了10枚奶牛胚胎的性别,目前已产下两头犊牛,其实际性别和鉴定结果相一致。
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结核分枝杆菌ESAT-6 DNA疫苗的细胞和体液应答及保护效率研究
《中国预防兽医学报 》 2003 北大核心 CSCD
摘要:构建了含分枝杆菌抗原ESAT_6( 6kDa)分泌蛋白 (结构基因 )的真核表达载体pJW43 0 3 ,进行了酶切鉴定和序列分析 ,确定含有正确的读码框。用脂质体介导法将重组表达质粒导入COS7细胞内并瞬时表达 ,收集表达细胞或浓缩上清液 ,进行SDS_PAGE电泳 ,用结核杆菌特异性抗体进行免疫印迹检测 ,证明上述重组质粒能在哺乳动物细胞中表达出特异蛋白。重组表达质粒肌注免疫小鼠 ,首免后 2 1d,未检测到特异性抗体 ,二免和三免 2 1d后ESAT_6的特异性抗体平均效价分别为 1∶40 0和 1∶80 0。三免后 2 1dESAT_6的特异性细胞因子γ_干扰素的浓度为 1 2 .8± 0 .4ng/mL,而阴性对照空载体DNA组三免后只诱导产生 <0 .1ng/mL的γ_干扰素。三免后经静脉强毒攻击 ,免疫组小鼠肺脏的细菌数比对照空载体组减少了 90 %以上。本研究表明 ,该核酸疫苗能同时诱导机体产生细胞和体液免疫应答并获得较高的保护效率。
关键词: 结核分枝杆菌 ESAT-6分泌蛋白抗原 ESAT-6DNA疫苗 免疫原性 保护
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鸡传染性法氏囊病模拟抗原苗免疫作用的探讨
《中国预防兽医学报 》 2002 北大核心 CSCD
摘要:用鸡传染性法氏囊病毒 (IBDV)免疫雏鸡 ,纯化其IgG(Ab1)免疫兔制备Ab2 ,Ab2 经正常鸡IgG(NC_IgG)和IBD抗原(Ag)吸收后 ,加佐剂免疫雏鸡 ,免疫保护指数 :Ab2 组分别为 :10 0 %、10 0 %、90 % ;对照组 :0 %。重复实验 :5 0只雏鸡接种 3次Ab2 免疫 ,能抵抗IBD强毒攻击 ,该试验证实 :IBD模拟抗原苗在IBD免疫中的应用价值
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新疆草地资源的劣化、原因及治理对策
《草业科学 》 2002 CSCD
摘要:对新疆草地水、土、生物环境等现状分析及人类活动对草地的影响分析结果表明,草地环境资源状况恶化,沙化、盐碱化加剧,草地退化严重。绿洲区过量截流引水改变了地表水和地下水的地域分布,是导致平原区草地(特别是近水源区域)资源急剧恶化的主要原因。长期严重超载过牧,是引起整个草地全方位退化的持续因素。人为的砍挖、人类过度的垦荒,特别是不科学的水土开发造成垦殖地的大量撂荒,又加剧草地区域生态环境恶化。
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细粒棘球绦虫cDNA克隆EgA31在大肠埃希氏菌M15中的表达及重组蛋白的纯化和复性
《中国兽医科技 》 2002 北大核心 CSCD
摘要:为了获得细粒棘球绦虫 66ku抗原的重组蛋白和抗血清 ,用该抗原的cDNA克隆EgA3 1构建了pQE3 0EgA3 1重组质粒 ,在大肠埃希氏菌M15中表达 ,经亲和层析获得纯度较高的EgA3 1重组蛋白 ;用经复性处理的重组蛋白免疫动物 ,获得EgA3 1重组蛋白抗血清。本文就重组蛋白的稳定性和在复性处理中遇到的问题进行了讨论。
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