文献类型: 中文期刊
作者: 易新萍 1 ; 叶锋 2 ; 姚刚 2 ; 谷文喜 2 ; 马晓菁 2 ; 吴冬玲 2 ; 钟旗 2 ;
作者机构: 1.新疆畜牧科学院兽医研究所
2.新疆畜牧科学院兽医研究所;新疆农业大学动物医学学院;新疆天康畜牧生物技术股份有限公司
关键词: 牛布鲁氏菌;A19-ΔVirB12突变株;同源重组;免疫保护
期刊名称: 微生物学报
ISSN: 0001-6209
年卷期: 2013 年 11 期
页码: 1213-1220
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 【目的】构建牛布鲁氏菌A19-ΔVirB12突变株并免疫BALB/c鼠,初步评估了其免疫保护效果。【方法】应用PCR方法扩增A19疫苗株VirB12基因的上下游同源臂序列,构建重组质粒pBK-CMV-SacBVirB12,将该质粒电击转化至布鲁氏菌A19感受态细胞中,筛选得到布鲁氏菌疫苗株A19的VirB12基因缺失株。以A19疫苗株为参照,应用A19-ΔVirB12疫苗接种BALB/c小鼠,免疫45d后布鲁氏菌2308强毒株攻毒,攻毒15d后取BALB/c鼠的脾脏进行克脾指数测定和病理组织学检测。Western-blotting鉴定VirB12蛋白的免疫反应性。【结果】构建了牛布鲁氏菌A19-ΔVirB12突变株,小鼠免疫攻毒后15d,A19-ΔVirB12免疫组和A19免疫组的克脾指数与对照组之间有显著性差异(P<0.05)。A19免疫组与A19-ΔVirB12免疫组之间克脾指数差异不显著(P>0.05)。Western blotting实验表明VirB12蛋白具有免疫反应性。【结论】牛布鲁氏菌A19-ΔVirB12突变株与亲本株A19免疫保护性无明显差异,通过血清学方法可区分疫苗免疫与野生型牛种布鲁氏菌(Brucella abortus)感染动物,具备作为标记疫苗的潜力。
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