科研产出
牛布鲁氏菌A19号疫苗免疫血清几种检测方法的比较
《中国动物检疫 》 2022
摘要：为选择科学适用的牛布鲁氏菌病净化检测方法,对1721份免疫布鲁氏菌A19号疫苗18个月后的牛血清,分别用虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)、竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)、间接酶联免疫吸附试验(iELISA)和荧光偏振试验(FPA)5种血清学检测方法,以及环介导等温扩增技术(LAMP)和荧光定量PCR病原学检测方法进行检测,分析比对不同检测方法的特异性、敏感性、误诊率、漏诊率、符合率、Kappa值等.结果显示:与SAT相比,其他4种血清学检测方法的敏感性、特异性和符合率从高到低依次为iELISA、FPA、cELISA、RBT,其中敏感性均在85.00%以上,特异性均在97.60%以上,符合率均在97.50%以上,Kappa值均≥1.00;与PCR相比,LAMP方法敏感性低(9.09%),但特异性强(99.65%),与PCR符合率高(98.49%).结果表明:血清学检测方法较为敏感特异,符合率和一致性均较高,而分子生物学检测方法特异性强,不易误诊和漏诊.因此,对于牛群的布鲁氏菌病净化,要结合牛群污染和免疫情况以及净化的不同阶段选择适用的检测方法,仅用一种方法可能会存在偏差.建议先用iELISA或FPA或RBT进行初筛,再用cELISA或SAT进行确诊,进而对确诊为阳性牛的阴道拭子或奶样进行分子生物学检测,以确定是否存在布鲁氏菌感染.本研究为免疫牛群的布鲁氏菌病净化检测方法选择提供了参考.
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牛种布鲁氏菌A19-△VirB12标记疫苗双重实时荧光定量PCR方法的建立
《中国人兽共患病学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：目的 建立一种区分牛种布鲁氏菌A19-△VirB12标记疫苗株与布鲁氏菌野毒感染株的双重荧光定量PCR方法.方法 分别以布鲁氏菌4型分泌系统中VirB8基因、VirB12基因序列设计2对引物及探针,优化实时荧光PCR反应体系及条件.以牛种布鲁氏菌A19-△VirB12标记疫苗株、牛种布鲁氏菌A19疫苗株、羊种布鲁氏菌M5疫苗株以及猪种布鲁氏菌S2疫苗株、大肠杆菌、沙门氏菌基因组DNA进行Realtime-PCR扩增,评价该方法特异性.分别构建布鲁氏菌VirB12基因和VirB8基因片段阳性质粒,10倍系列稀释后进行Realtime-PCR扩增,测定该方法的敏感性.结果 本方法具有良好的特异性,牛种布鲁氏菌A19疫苗株、羊种布鲁氏菌M5疫苗株以及猪种布鲁氏菌S2疫苗株基因组DNA同时出现VirB8基因与VirB12基因阳性扩增,牛种布鲁氏菌A19-△VirB12标记疫苗株仅出现VirB8基因阳性扩增,大肠杆菌、沙门氏菌均未扩增出 目的条带,对VirB8基因及VirB12基因片段阳性质粒的检测限分别为约102copies/μL和103 copies/μL.该方法仅用于鉴别区分牛种布鲁氏菌A19-△VirB12标记疫苗株与布鲁氏菌野毒株.结论 本研究建立的布鲁氏菌双重Realtime-PCR方法,具有良好的特异性和敏感性,为今后鉴别牛种布鲁氏菌A19-△VirB12分子标记疫苗免疫牛与 自然感染牛提供技术支撑.
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2016-2020年新疆生产建设兵团布鲁氏菌病监测分析
《草食家畜 》 2021
摘要：为了解新疆生产建设兵团2016-2020年布鲁氏菌病流行情况,预判流行趋势,评估疫情发生风险。采用虎红平板凝集试验（RBPT）开展2016-2020年新疆生产建设兵团牛、羊、猪血清样品布鲁氏菌病监测工作。2016-2020年五年间,兵团共累计监测布病样品2 185 312份,感染抗体阳性15 928份,抗体阳性率达0.73%（159 28/2 185 312）,其中奶牛布病总阳性率达0.18%（1071/583 146）,其他品种牛布病总阳性率达0.24%（436/181 148）,羊布病总阳性率达1.03%（14 413/1 405 091）,猪布病总阳性率达0.05%（8/15 927）,奶牛、其他牛、羊和猪之间差异极显著（χ2=4805.56,P<0.01）,结果呈现明显的下降趋势。兵团辖区对布鲁氏菌病进行干预后,该病虽得到一定控制,但仍有流行扩散风险,给人畜间带来危害。建议今后继续做好动物布鲁氏菌病动态监测,积极落实净化措施,确保兵团布病防控工作有效开展。
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几种布鲁氏菌ELISA抗体试剂盒对牛血清的临床检测评价
《中国兽医杂志 》 2021 北大核心
摘要：为了评价目前市面流通的部分ELISA布鲁氏菌病（简称"布病"）抗体检测试剂盒对牛血清的检测效果,本试验采集了不同地区的牛血清样品300份,应用虎红平板凝集试验（RBT）及试管凝集试验（SAT）进行了布病抗体阴阳性确诊后,用不同厂家的ELISA试剂盒开展了比对试验。结果表明,4种iELISA布病抗体检测试剂盒的敏感性在97.9%～100.0%,特异性介于18.2%～27.3%,总体符合率在74.3%～77.1%,两两试剂盒检测结果之间的Kappa值分布在0.707～0.916。5种cELISA布病抗体检测试剂盒的敏感性在95.8%～100.0%,特异性介于22.7%～81.8%,总体符合率在74.3%～92.9%,两两试剂盒检测结果之间的Kappa值分布在0.394～0.972。本研究结果表明,不同厂家的ELISA试剂盒的检测结果存在差异性,这将为布鲁氏菌病的临床确诊提供了数据基础。
关键词： 布鲁氏菌 布鲁氏菌病 牛 iELISA cELISA 评价
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新疆2家牛场引进安格斯牛的牛病毒性腹泻、牛传染性鼻气管炎和布鲁氏菌病检测
《中国动物检疫 》 2020
摘要：为了解新疆当地牛病毒性腹泻(BVD)、牛传染性鼻气管炎(IBR)和布鲁氏菌病对引进安格斯牛的影响,对2家牛场新引进的和引进2年以上的安格斯牛进行BVD、IBR和布鲁氏菌病病原学和血清学检测.结果显示,新引进的安格斯牛未检测出BVD抗原、IBR病原核酸、布鲁氏菌感染抗体,而引进2年以上的安格斯牛虽未检出BVD抗原,但IBR病原感染抗体阳性率为100%,且PCR核酸阳性率为20%,布鲁氏菌感染抗体阳性率为5%.结果表明,新引进的安格斯牛虽未感染这3种疫病病原,但引进后有较大的感染风险.结果提示,牛场需加强BVD、IBR和布鲁氏菌病防控,实施全群免疫,筛选并淘汰感染牛,坚持自繁自养,慎重从场外引进牛只.
关键词： 安格斯牛 牛病毒性腹泻 牛传染性鼻气管炎 布鲁氏菌病 检测
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布鲁氏菌活疫苗(M5)免疫试验——多浪羊抗体消长规律研究
《中国动物检疫 》 2019
摘要：为探究多浪羊布鲁氏菌活疫苗(M5)的免疫抗体消长规律,在新疆南疆地区某行政村,选择100只多浪羊进行皮下注射布鲁氏菌活疫苗(M5)免疫试验。免疫前,对所有试验羊只全部采血,分别于免疫后30、90、180 d,随机采集30只羊全血,分离血清,用虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)进行布鲁氏菌抗体检测。结果显示:免疫前,所有试验羊只均未检测到抗体,免疫30 d后,73.33%的羊检测到抗体,90d后只有13.30%的羊还能检测到抗体,180 d后未检测到抗体。结果表明,布鲁氏菌活疫苗(M5)能够使多浪羊产生良好的免疫反应,免疫抗体持续期约为180 d。这说明对免疫180 d后的多浪羊进行布鲁氏菌抗体检测,可为区分自然感染和免疫提供参考。
关键词： 布鲁氏菌病 布鲁氏菌活疫苗(M5) 抗体消长规律 多浪羊
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新疆阿勒泰地区牛羊布鲁氏菌病流行病学调查与分析
《草食家畜 》 2019
摘要：(目的)分析新疆阿勒泰地区布鲁氏菌病的疫情状况,为制定行之有效的防控措施提供科学依据。(方法)采用虎红平板凝集试验(RBPT)开展2007-2018年阿勒泰地区6县1市牛羊血清样品布鲁氏菌病监测工作。(结果)阿勒泰地区牛羊布鲁氏菌病的检出率呈现波动趋势,牛布鲁氏菌病疫情总体上较羊严重(X~2=3553.89,P<0.01)。牛布鲁氏菌病检出率自2007年逐渐上升,在2009、2012和2015年出现高峰,阳性检出率分别为1.41%(415/29442)、3.04%(2404/79181)和4.09%(2091/51157);羊布鲁氏菌病疫情则在2009年和2015年出现高峰,阳性检出率分别为1.17%(209/17869)和3.45%(699/20277)。吉木乃县牛羊布鲁氏菌病检出率均较低,福海县牛布鲁氏菌病检出率相对较低,青河县羊布鲁氏菌病检出率相对较低,其余县市牛羊布鲁氏菌病检出率均较高。(结论)阿勒泰地区布鲁氏菌病流行虽得到一定控制,但仍有流行扩散风险,给人畜间带来危害。建议今后对阿勒泰地区动物布鲁氏菌病继续做好动态监测,及时采取包括牧场净化在内的布鲁氏菌病控制措施,以及加强与相关人兽疾病防控及研究机构在布鲁氏菌病病原学、血清诊断学等方面的合作研究。
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2018年三亚雪古丽牛羊布鲁氏菌病及口蹄疫监测与风险评估
《草食家畜 》 2018
摘要：为持续性确保三亚雪古丽牛羊口蹄疫无疫及处于布鲁氏菌净化状态,雪古丽对自有及引进羊群进行了口蹄疫免疫抗体检测及病原学检测,同时对羊群进行了布鲁氏菌病抗体检测。口蹄疫免疫抗体检测应用液相阻断ELISA方法;口蹄疫病原学检测采用多重RT-PCR;布鲁氏菌病用虎红平板方法检测。检测结果:未检测到布鲁氏菌抗体阳性动物,牛羊中目前不存在口蹄疫病畜或健康带毒畜,牛羊口蹄疫免疫抗体未达到国家规定水平的应及时补免。2018年三亚雪古丽牛羊布鲁氏菌病及口蹄疫监测结果表明,雪古丽的羊场目前不存在布鲁氏菌感染情况;牛羊中仅牛O型口蹄疫群体免疫水平达到国家重大动物疫病规定标准,免疫抗体不合格动物应及时给予补免,病原学检测结果表明目前雪古丽的牛羊及引进羊未被口蹄疫病毒感染。
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羊屠宰环节布鲁氏菌病检疫漏检的初步定量风险评估
《中国动物检疫 》 2017
摘要：[目的 ]评估屠宰环节布鲁氏菌病漏检对屠宰从业人员和消费环节羊肉消费者的潜在健康风险及其干预措施。[方法 ]利用屠宰环节肉品风险评估专项监测中的定量监测数据,以及文献检索数据、专家咨询和调研结果,采用@RISK软件,分析估计屠宰环节布鲁氏菌病检疫漏检情况下的感染人数和消费者因烹调不当发生布鲁氏菌感染的风险。[结果 ]构建了屠宰环节布鲁氏菌病漏检感染风险模型。假设接触漏检羊感染布鲁氏菌病的概率为20%,那么0.001%、0.08%、1.5%三种漏检概率可能导致的感染人数分别为0~4人、0~114人和7~1 829人(90%置信区间);不同接触感染概率的感染人数有较大差异:5%概率时每年有0~541人可能感染布鲁氏菌病;60%概率时,多数情况下有155人感染布鲁氏菌病,最多可达到6 473人。应用该模型对某省居民消费漏检布鲁氏菌病羊肉后新增布鲁氏菌病感染人数的估算结果表明:按照0.1%概率计算,该省2016年度屠宰313.25万只羊可能新增布鲁氏菌病感染病例111~148例(90%置信区间)。如果因厨房生熟不分、烹调不当等因素而使感染概率提高至1%,则可能出现1 234~1 352个新增病例。[结论 ]羊屠宰环节存在布鲁氏菌病检疫漏检现象,从业人员受布鲁氏菌病感染风险较高;消费环节存在因烹调不当而导致的布鲁氏菌病感染风险;应加强养殖环节羊群布鲁氏菌病的控制和宰前检疫,提升从业人员和消费者对布鲁氏菌病危害的认知水平。
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