金黄色葡萄球菌336型多糖偶联抗原的制备及免疫原性

吴建勇; 杨学云; 李建军; 王登峰; 王治才; 《中国兽医科学 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：采用溶葡萄球菌酶消化菌体释放金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)336型多糖(Type 336polysaccharides,336PS),梯度乙醇浓度浸提和用不同酶消化进行粗提,通过凝胶过滤层析纯化得到了336PS多糖,并对其纯度进行检测。将336PS通过ADH间桥法与BSA连接制备偶联抗原,采用凝胶过滤层析纯化,200~400nm波长扫描鉴定,从层析波峰和检定波长判定偶联成功。加佐剂制备成疫苗免疫小鼠,进行抗体检测和小鼠免疫保护试验。结果表明,纯化的336PS纯度为685.1g/kg;偶联抗原波峰较BSA前移,其原最高吸收波峰为212nm,从206nm向280nm偏移。偶联抗原336PS-BSA可以刺激小鼠产生抗336PS的免疫应答反应,并能够对免疫小鼠提供免疫保护作用。

关键词： 336型多糖 金黄色葡萄球菌 偶联抗原 免疫原性

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新疆褐牛催乳素(PRL)基因第4外显子多态性及其与泌乳性能的关联分析

热伊莱·伊卜拉伊木; 王雅春; 黄锡霞; 付雪峰; 郭俊清; 席艾力·依明; 郭志勤; 马那提·哈山; 李静; 《新疆农业大学学报 》 2013 北大核心

摘要：运用PCR-SSCP和测序技术分析了催乳素基因第4外显子在新疆褐牛群体中的遗传多态性,并运用SAS8.1统计软件对不同基因型与泌乳性能的关系进行了最小二乘分析。结果表明,PRL基因第4外显子发生了G8377C,A8398G两处突变,引起单链构象多态性,新疆褐牛群体中检测到AA、AB和BB 3种基因型,基因型频率分别为0.345,0.526,0.129,A、B等位基因频率分别为0.608,0.392;经最小二乘分析发现BB和AB基因型母牛的乳蛋白率显著高于AA基因型(P<0.05),AA基因型母牛的日产奶量显著高于AB基因型(P<0.05)。分析结果提示,PRL基因第4外显子上的碱基突变位点可能是影响新疆褐牛泌乳性能的重要位点。

关键词： 催乳素基因 PCR-SSCP 泌乳性能 新疆褐牛

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影响南疆绒山羊主要性状的非遗传因素分析

陶卫东; 李彦飞; 田可川; 张福全; 张西顺; 黄锡霞; 郑文新; 吕雪峰; 乌兰; 《新疆农业科学 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：[目的]探究主要非遗传因素对南疆绒山羊主要性状的影响。[方法]利用SAS 8.1软件的GLM程序,分析性别和年度对产绒量、初生重、断乳重、绒纤维直径以及绒纤维直径离散的影响。[结果]性别、年度对产绒量、断乳重、绒纤维直径以及绒纤维直径离散都有极显著的影响(P<0.01);年度对初生重有显著的影响(P<0.05);性别和年度对初生重、绒纤维直径离散影响不显著(P>0.05),对产绒量、断乳重和绒纤维直径影响极显著(P<0.01)。[结论]在估计南疆绒山羊遗传参数和育种值时,对以上5个性状有显著影响的因素可以作为固定效应放到模型中。

关键词： 南疆绒山羊 非遗传因素 主要性状

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牛布鲁氏菌A19突变株的构建及在BALB/c鼠中的免疫保护评估

易新萍; 叶锋; 姚刚; 谷文喜; 马晓菁; 吴冬玲; 钟旗; 《微生物学报 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：【目的】构建牛布鲁氏菌A19-ΔVirB12突变株并免疫BALB/c鼠,初步评估了其免疫保护效果。【方法】应用PCR方法扩增A19疫苗株VirB12基因的上下游同源臂序列,构建重组质粒pBK-CMV-SacBVirB12,将该质粒电击转化至布鲁氏菌A19感受态细胞中,筛选得到布鲁氏菌疫苗株A19的VirB12基因缺失株。以A19疫苗株为参照,应用A19-ΔVirB12疫苗接种BALB/c小鼠,免疫45d后布鲁氏菌2308强毒株攻毒,攻毒15d后取BALB/c鼠的脾脏进行克脾指数测定和病理组织学检测。Western-blotting鉴定VirB12蛋白的免疫反应性。【结果】构建了牛布鲁氏菌A19-ΔVirB12突变株,小鼠免疫攻毒后15d,A19-ΔVirB12免疫组和A19免疫组的克脾指数与对照组之间有显著性差异(P<0.05)。A19免疫组与A19-ΔVirB12免疫组之间克脾指数差异不显著(P>0.05)。Western blotting实验表明VirB12蛋白具有免疫反应性。【结论】牛布鲁氏菌A19-ΔVirB12突变株与亲本株A19免疫保护性无明显差异,通过血清学方法可区分疫苗免疫与野生型牛种布鲁氏菌(Brucella abortus)感染动物,具备作为标记疫苗的潜力。

关键词： 牛布鲁氏菌 A19-ΔVirB12突变株 同源重组 免疫保护

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不同羊毛纤维直径细毛羊皮肤组织差异表达基因研究

狄江; 拉扎提·艾尼瓦尔; 徐新明; 张艳花; 田可川; 田月珍; 吴伟伟; 于丽娟; 哈尼克孜·吐拉甫; 《畜牧兽医学报 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：为了筛选不同被毛纤维直径的细毛羊皮肤组织中的差异表达基因,本研究利用Agilent公司绵羊表达谱芯片和Affymetrix公司牛表达谱芯片对不同被毛纤维直径的细毛羊皮肤组织mRNA进行了芯片杂交;运用Sig-nificance Analysis of Microarrays(SAM)法对基因表达谱进行了差异分析;并通过分子注释系统平台(MAS3.0)对差异表达基因进行了功能富集类分析和调控通路分析;通过实时定量PCR对部分差异表达基因进行了验证。芯片试验共检测到267个差异表达的基因,其中上调基因106个,下调基因161个。Kegg和GO分析表明,参与细胞凋亡、增殖及分化、蛋白质代谢、Wnt信号通路以及羊毛角蛋白结构等生物学过程的多个基因表达水平发生了显著变化。所验证的差异表达基因的荧光定量PCR结果与芯片结果基本一致。结果表明,不同被毛纤维直径的细毛羊皮肤组织的基因表达谱存在差别,这些基因的不同表达可能通过改变皮肤毛囊和羊毛分化过程影响被毛纤维直径。这些基因的发现将为进一步筛选影响羊毛纤维直径性状的重要候选基因/分子标记提供研究基础。

关键词： 细毛羊 纤维直径 基因表达 基因芯片

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靶向O型口蹄疫病毒shRNA转基因猪体细胞抗病毒活性研究

蔡扩军; 马铈委; 乔军; 孟庆玲; 陈创夫; 黄炯; 张再超; 杨海波; 《中国预防兽医学报 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：为研究靶向O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1基因shRNA转基因猪体细胞的抗病毒活性,本实验在成功培育转基因克隆猪的基础上,通过分离与培养转基因猪体细胞,对其shRNA进行PCR和Southern blot检测,并将FMDV感染体细胞中,通过细胞病变(CPE)、间接免疫荧光试验(IFA)和实时荧光定量PCR(Real-time PCR)分析转基因猪体细胞抗FMDV活性。结果表明,转基因猪体细胞基因组DNA中携带有靶向FMDV VP1基因的shRNA基因片段。与非转基因猪体细胞相比,接种FMDV转基因猪体细胞其出现CPE的时间延迟,细胞内病毒含量显著降低,细胞感染病毒36 h时,对细胞中FMDV VP1基因抑制效率为53.6%。表明该靶向FMDV shRNA转基因克隆猪体细胞在体外具有良好的抗病毒活性。本研究为进一步在体内评价转基因动物的抗病毒活性奠定了基础。

关键词： shRNA 转基因克隆猪 体细胞 抗病毒活性

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牛乳样品中布鲁氏菌的分离和鉴定

易新萍; 马晓菁; 闫晶华; 谷文喜; 刘丽娅; 叶锋; 吐尔洪·努尔; 钟旗; 《中国预防兽医学报 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：为进一步改良布鲁氏菌(Brucella)的分离和鉴定方法,本研究于2010年～2012年对新疆部分奶牛场进行Brucella病的监测,采用改良Brucella选择添加剂培养分离的方法,从试管凝集试验(SAT)检测阳性的25头奶牛的牛乳样中分离到9株分离菌,经VirB8-PCR方法扩增Brucella的VirB8基因对分离株进行鉴定,结果表明9个分离株均为Brucella。同时采用Brucella分子分型PCR及生物学分型方法进一步対分离株鉴定,结果显示其中7个分离株为牛3型,另外2个分离株为羊3型。本研究为奶牛Brucella病的检疫与防控提供了快速分离及鉴定方法。

关键词： 牛乳 布鲁氏菌 分离鉴定

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深入开展动物疫病流行病学调查工作提高动物疫病防控水平

王长江; 杨会国; 《中国兽医杂志 》 2013 北大核心

摘要：流行病学调查工作是重大动物疫病防控中一个至关重要的环节。世界动物卫生组织(OIE)对流行病学信息的报告有明确的规定。联合国粮农组织(FAO)专门赞助出版了《实用兽医流行病学与群发病控制》一书,并由OIE和FAO向世界各国推荐欧美等发达国家高度重视流行病学调查工作,均有详细的国家流行病学调查方案,并将其作为动物疫病防控的核心内容之一。我国系统的动物疫情流行病学调查工作开展的时间不长,一些地方及部分从事动物疫病防控工作的兽医人员对动物流行病学调查工作的作用认识不足,流行病学调查工作没有很

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流产布鲁氏菌疫苗A19-ΔVirB12突变株生物学特性研究

易新萍; 谷文喜; 吴冬玲; 李延涛; 马晓菁; 《中国人兽共患病学报 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：目的为了开发布鲁氏菌病新型标记疫苗,对流产布鲁氏菌A19-ΔVirB12突变株生物学特性研究。方法以亲本A19菌株为参照,对A19-ΔVirB12突变株的菌落形态、生物学特性、毒力、遗传稳定性、免疫原性进行实验比较。结果 A19-ΔVirB12突变株形态及生化特性同亲本株A19基本一致,其毒力弱于A19。A19-ΔVirB12突变株遗传稳定性良好且与A19具有相似的免疫原性。结论流产布鲁氏菌A19-ΔVirB12株毒力较低、遗传性状稳定、并具有良好的免疫保护效力,可作为新型动物布鲁氏菌病标记疫苗研制的候选株。

关键词： 流产布鲁氏菌 A19-ΔVirB12突变株 稳定性 毒力 免疫原性

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靶向口蹄疫病毒shRNA表达载体转染后特异性siRNA的分子检测

蔡扩军; 孟庆玲; 乔军; 陈创夫; 马饰委; 黄炯; 张再超; 田振中; 杨丽红; 《中国兽医学报 》 2013 北大核心 CSCD

摘要：通过Poly A polymerase对小干扰RNA分子(Small interfering RNA,siRNA)3′端进行加"Poly A"处理,然后进行RT-PCR扩增,并将扩增产物克隆到T载体上进行测序。结果表明,通过该方法可以快速检测FMDV特异性siRNA分子的表达,这为siRNA的干扰FMDV复制分子机制和抗FMDV转基因动物细胞水平的评价研究提供了技术支撑。

关键词： siRNA 表达 反转录PCR 口蹄疫病毒

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