新疆荷斯坦牛β防御素5基因的克隆、表达及表达产物的抑茵活性

毛秀敏; 张雪梅; 杨帆; 贺三刚; 刘明军; 《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2011 北大核心 CSCD

摘要：[目的]克隆和表达新疆荷斯坦牛中性粒细胞防御素5(BNBD5)基因,对BNBD5蛋白进行纯化并分析其抗菌活性.[方法]利用RT-PCR方法扩增新疆荷斯坦奶牛BNBD5的cDNA序列,将BNBD5 cDNA克隆到原核表达载体pGEX-4T-2,测序分析后转化大肠埃希菌BL21(DE3).经IPTG诱导后,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blotting分析;利用GST亲和柱纯化BNBD5蛋白,并进行体外抑菌试验.[结果]通过PCR扩增获得了218bp的牛BNBD5全长cDNA序列,经IPTG诱导,获得了约33 ku的牛BNBD5蛋白.牛BNBD5蛋白在1525℃培养时的可溶性较37℃时多,且大多以包涵体形式存在,经纯化后最终获得了少量的目的蛋白.纯化的BNBD5蛋白对标准金黄色葡萄球菌和标准大肠埃希菌均具有明显的抑菌活性.[结论]克隆、表达了牛BNBD5基因,表达的BNBD5蛋白对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌都有抑菌活性.

关键词： 抗菌肽 BNBD5基因 克隆 原核表达 抑菌活性

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胎儿期哺乳动物进行精原干细胞研究的初步探讨

苏亮; 唐志高; 《中国畜牧兽医 》 2011 北大核心

摘要：作者以精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)目前的研究现状为基础,从试验动物年龄选择入手,综述了胎儿时期前精原细胞和新生动物精原干细胞形态和功能差异,试图为SSCs研究中分离、纯化、富集高纯度的SSCs提供新的研究思路。

关键词： 精原干细胞 前精原细胞 胎儿期

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哈萨克马的DRA与DQA基因的SSCP检测及序列分析

于丽娟; 张艳花; 田可川; 徐新明; 吴伟伟; 王晶; 玛尔孜亚; 哈尼克孜; 黄文来; 王力俭; 《新疆农业科学 》 2011 北大核心 CSCD

摘要：【目的】了解哈萨克马ELA-DRA*exon2、ELA-DQA*exon2的等位基因分布及其特性,为马的抗病育种提供理论基础。【方法】采用聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)方法检测哈萨克马ELA-DRA*exon2、ELA-DQA*exon2的等位基因分布,并对不同等位基因的核苷酸与氨基酸序列进行分析。【结果】在47匹哈萨克马中,ELA-DRA* exon2有3个等位基因,其中两种等位基因在纯合子中被检出,另外一种等位基因在杂合子中被检出;ELA-DQA* exon2有7个等位基因,且都以纯合子被检出,通过核苷酸序列比对发现其中5个为新等位基因。【结论】ELA-DRA*exon2、ELA-DQA*exon2的各每位基因序列分析结果表明,发生非同义替换的多态位点均主要分布在抗原结合位点对应的编码序列中。

关键词： 哈萨克马 PCR-SSCP ELA-DRA*exon2 ELA-DQA*exon2 等位基因

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绵羊FecB基因打靶载体构建

吴伟伟; 王力俭; 田可川; 徐新明; 张廷虎; 张艳花; 哈尼克孜; 《畜牧与兽医 》 2011 北大核心

摘要：利用peGFP-C1,pRET.IL.PGK-TK和pMD19-T Simple等基本质粒,构建绵羊FecB基因打靶载体。以克隆载体pMD19-T Simple为载体骨架,插入一个正选择标记eGFP基因、一个负选择标记基因HSV-tk基因,并在eGFP基因两侧各添加一个同源长臂和同源短臂,从而构建绵羊FecB基因打靶载体。结果:经多个限制性内切核酸酶酶切鉴定和测序证实,所构建的基因打靶载体符合设计要求,表明成功构建了绵羊FecB基因打靶载体。

关键词： FecB基因 基因打靶 载体构建 绵羊

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TLR2基因多态性与奶牛体细胞评分的相关性研究

白杰; 林嘉鹏; 袁芳; 侯敏; 李文蓉; 刘明军; 《畜牧兽医学报 》 2011 北大核心 CSCD

摘要：旨在分析Toll-样受体2在奶牛隐性乳房炎中的作用。本研究以同一牛场内的中国荷斯坦奶牛和新疆褐牛为研究对象,选取奶牛体细胞数小于20万和大于100万的个体各15头,对TLR2基因进行测序,然后对发现的多态位点进行PCR-RFLP检测,分析这些位点与体细胞评分(SCS)的相关性。结果发现了TLR2基因E+189、E+631和E+2260 3个SNP位点,其中E+631和E+2260位点为本试验首次发现。E+189、E+631和E+2260 3个SNP位点在2个品种内均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05);3个位点在2个品种间的基因型分布差异都极显著(P<0.01)。分析每个SNP位点与SCS的相关性,显示TLR2E+189位点AA比BB和AB基因型个体的SCS高(P<0.05),AB与BB基因型个体的SCS差异不显著(P>0.05);说明BB基因型个体的乳房炎发病率低。而TLR2E+631的SCS和TLR2E+189位点表现相似,但各个基因型个体间的SCS差异不显著(P>0.05)。E+2260位点AA基因型个体比AB的SCS低(P>0.05)。新疆褐牛的SCS低于荷斯坦牛(P<0.01),说明新疆褐牛乳房炎发病率比荷斯坦牛低。在发现的3个SNP位点中,E+189位点对奶牛的SCS有显著影响(P<0.05),TLR2基因SNP位点在2个品种内的分布差异可能是新疆褐牛比荷斯坦牛乳房炎发病率低的原因之一。

关键词： 新疆褐牛 TLR2基因 隐性乳房炎 体细胞评分

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新疆褐牛POU1F1基因多态性分析及早期生长曲线比较

牛志刚; 史洪才; 刘明军; 黄锡霞; 周振勇; 张扬; 《西北农业学报 》 2011 北大核心 CSCD

摘要：垂体特异性转录因子1((Pituitary Specific Transcription Factor 1,POU1F1)基因是POU基因家族的成员之一,对哺乳动物生长发育、新陈代谢起主要的调控作用。采集116份新疆褐牛血样,利用PCR-RFLP技术检测POU1F1基因第6外显子的多态性,分析不同基因型与生长性状的相关性。结果表明,新疆褐牛的POUIFI基因第6外显子HinfI位点有多态性,新疆褐牛群体在该位点上处于Hardy-Weinberg平衡状态,等位基因A/B的频率分别为0.375/0.625。3种不同基因型间个体出生体质量及1~5月龄体质量的差异不显著(P>0.05),而BB基因型6月龄体质量与AA基因型差异显著(P<0.05)。应用Logistic、Gompertz和Von Bertalanffy 3种非线性生长模型对新疆褐牛POU1F1基因3种基因型个体进行生长曲线拟合,所选生长曲线模型均可以较好地预测机体的生长发育情况,拟合优度(R2)均大于0.995。AA、AB、BB基因型3种生长曲线比较,BB基因型具有极限体质量大,生长速率快,拐点体质量及生长拐点月龄大等特点。

关键词： 新疆褐牛 POU1F1基因 PCR-RFLP 生长曲线

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伊犁绢蒿根系贮存性营养物质和渗透调节物质季节变化及对刈割强度的响应

侯钰荣; 安沙舟; 侯玉林; 陈乐宁; 《新疆农业科学 》 2011 北大核心 CSCD

摘要：【目的】通过小区控制刈割试验,研究及了解不同刈割强度对伊犁绢蒿根系贮存性营养物质及渗透调节物质的影响。【方法】分别用蒽酮比色法、茚三酮比色法、考马斯亮蓝法测定伊犁绢蒿根系可溶性糖、淀粉、脯氨酸、可溶性蛋白含量。【结果】(1)伊犁绢蒿根系随季节变化,可溶性糖呈"双峰曲线"变化,淀粉呈倒"S"变化,游离脯氨酸呈不规则"单峰曲线"变化,可溶性蛋白呈"微波浪曲线"变化,且各种处理出现的峰值时间相同;(2)伊犁绢蒿根系可溶性糖和淀粉变化趋势相反,在营养物质积累前(9月15日以前)呈互补状态,但淀粉含量比可溶性糖含量高;(3)伊犁绢蒿根系对贮存营养物质和渗透调节物质的响应均存在滞后性,相比而言,可溶性蛋白的滞后时间最短;(4)刈割强度在各处理间均有显著性影响(P<0.05),有些差异达极显著(P<0.01)。【结论】刈割强度对伊犁绢蒿根系的生理抗性有很大影响。

关键词： 根系 刈割强度 季节变化 响应 伊犁绢蒿 贮存性营养物质 渗透调节物质

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影响荷斯坦奶牛难产度的因素分析

李宗方; 叶东东; 黄锡霞; 热西提·阿不都热合曼; 孙红晨; 古丽夏提; 刘志强; 《新疆农业科学 》 2011 北大核心 CSCD

摘要：【目的】从繁殖和生产性能上探讨各因素对新疆地区荷斯坦奶牛难产度的影响。【方法】采用SAS8.1软件对影响难产度的因素进行最小二乘方差分析。【结果】:不同胎次对难产度有显著的影响(P<0.05);不同产犊季节对难产度有显著的影响(P<0.05);怀孕天数对难产度的影响不显著(P>0.05);产犊间隔对难产度有极显著的影响(P<0.01);犊牛的性别对难产度有显著的影响(P<0.05);犊牛的初生重对难产度有极显著的影响(P<0.01);产犊类型对难产度有极显著的影响(P<0.01);305 d产奶量对难产度影响不显著(P>0.05)。【结论】通过大量的记录资料对荷斯坦奶牛难产度因素进行分析,这将有利于牛场有效地预防难产,降低难产的发生率。

关键词： 荷斯坦奶牛 难产度 胎次 产犊季节 产犊间隔 305d产奶量

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基因表达差异对牛胚胎发育潜能的影响

毋状元; 孙美玉; 海里且木; 郑新宝; 董红; 霍飞; 陈静波; 《动物医学进展 》 2011 北大核心 CSCD

摘要：随着牛胚胎体外生产(IVP)技术的不断成熟,体外胚胎生产在一些国家已进入商业化运营阶段。但与体内胚胎相比其移植受体妊娠率、产犊率及胎儿的后天发育能力均较差。因此,开发一种既可靠又实用的检测胚胎发育潜能的技术显得尤为重要。应用实时荧光定量PCR技术检测早期胚胎基因表达,通过分析mRNA的表达丰度来评价卵母细胞成熟情况和胚胎质量是一种可行的方法。论文综述了国内外有关牛卵母细胞成熟和早期胚胎发育过程中部分基因mRNA表达状况,分析了基因表达与胚胎潜能的关系。

关键词： 基因表达 实时荧光定量PCR 胚胎发育潜能 牛

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测定羊血液中三苯双脒浓度的高效液相色谱方法的试验

席耐; 宋迎春; 石保新; 党新生; 严风; 何国声; 《中国兽医杂志 》 2011 北大核心

摘要：三苯双脒(Tribendi midin)属于氨基苯脒类化合物,本品化学名称为N,N'-双-[4'-(1-二甲氨基乙亚基氨基)-1,4,-苯基二甲基亚氨。分子式为C28H32N6452.60。分子结构图为:

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