科研产出
结核分枝杆菌三价DNA疫苗的体液免疫与细胞免疫应答
《中国兽医科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要:为研究结核分枝杆菌Ag85B、MPT64和MPT83抗原DNA疫苗在奶牛体内诱导的免疫应答,以PJW4303为载体,构建了上述3种抗原基因的三价DNA疫苗。采用阴离子交换色谱方法提取3种质粒,混合后添加佐剂DDA免疫3月龄荷斯坦奶牛3次,采用ELISA法检测免疫奶牛的特异性抗体效价。利用双抗夹心ELISA定量测定免疫奶牛各月的IFN-γ浓度。结果显示,纯化后的DNA疫苗经质量检验达到动物免疫试验的要求;免疫前奶牛体内特异性抗体为阴性;三免后第30天MPT83、Ag85B和MPT64特异性抗体效价达到最高,均值分别为1∶3 200、1∶2 560和1∶2 880;同时免疫奶牛MPT83、Ag85B、MPT64三种蛋白诱导产生的IFN-γ在三免后第30天达到最高,分别为(630.25±94.45)、(341.65±76.75)、(51.38±9.80)pg/mL,阴性对照组PBS的IFN-γ浓度为(6.48±20.88)pg/mL。每个月的阴性对照与3种抗原相比,差异均极显著(P<0.01)。证实该三价核酸疫苗能同时诱导机体产生细胞免疫应答和体液免疫应答,可能有利于增强疫苗对结核病的抗性。
关键词: 结核分枝杆菌 阴离子交换色谱 DNA疫苗 免疫应答


DTT延缓绵羊卵母细胞老化的研究
《中国畜牧杂志 》 2011 北大核心
摘要:探讨在培养基中添加二流苏糖醇(DTT)能否延缓卵母细胞的老化进程。采用孤雌激活、单精子注射、体细胞核移植、Real-time-PCR方法研究了DTT对绵羊老化卵母细胞后续发育效率以及母源基因表达水平的影响。结果表明:DTT处理后的老化卵母细胞其核移植重构胚的受精率显著升高(P<0.05),囊胚率差异不显著(P>0.05);DTT显著增加了老化卵母细胞其单精子注射胚的囊胚率(P<0.05);DTT处理后的老化卵母细胞除Zar1水平稍低于老化卵母细胞外(P<0.05),其他3个母源基因(Mater、Dnmt1和GDF9)表达水平显著降低(P<0.05)。结果显示,DTT能在一定程度上延缓卵母细胞老化进程,改善老化卵母细胞的质量。


新疆奶牛乳源大肠杆菌毒力相关基因eaeA的克隆及序列分析
《新疆农业大学学报 》 2011 北大核心
摘要:从采自新疆乌鲁木齐市周边的5个奶牛场疑患隐性乳腺炎奶牛乳样,分离、纯化、鉴定出34株牛乳源大肠杆菌。根据GenBank发表的大肠杆菌16S rRNA序列和eaeA基因序列,用Oligo 6.0软件分别设计两对特异性引物,对分离菌株进行复检,并利用聚合酶链式反应(PCR)对eaeA基因进行扩增,结果10株为阳性,阳性率为29.4%(10/34)。将阳性样品进序列分析,结果与已发表的序列同源率为65%以上。与FJ609802株同源性较高,同源性75%。将阳性菌株用大肠埃希氏菌O抗原定型血清标定,以O21血清型的菌株eaeA基因阳性率较高。


犬胆道感染的诊疗
《畜牧与兽医 》 2011 北大核心
摘要:7个犬胆道感染病例的临床检查、实验室检验结果及其治疗效果的归纳总结表明,该病多发于6岁以上犬,临床症状以上腹部疼痛敏感为主。血常规检查显示病犬白细胞(WBC)和嗜中性粒细胞(Neu)水平升高,淋巴细胞(Lym)水平降低,核左移。血清生化检查见γ谷氨酰转移酶(GGT)升高,多数病例总胆红素(TBI)、直接胆红素(DBI)和碱性磷酸酶(ALP)升高。治疗以抗菌为主,药物选择主要考虑抗肠道需氧杆菌,同时考虑铜绿假单胞菌和厌氧菌;解痉镇痛作为辅助治疗手段,亚硫酸氢钠甲萘醌(VK3)具有胆道镇痛功效,起到一定的治疗诊断价值。


新疆玉米新自交系耐旱性鉴定与评价
《西北农业学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要:采用玉米开花期干旱胁迫法,以籽粒产量为主要性状,结合株高、穗位高、穗长、秃尖长、穗行数、行粒数、穗粒数、ASI值等性状,用种质耐旱性指数(DTIg)作为玉米自交系资源耐旱性鉴定与评价的主要指标,对49份玉米自交系耐旱性做了鉴定与评价。筛选出新自672、新自641、新自636、新自534、新自521、新自635、A14-2、运642等8份干旱胁迫条件下花期协调,耐旱性极强的新玉米自交系。


三苯双脒肠溶片在羊体内药物代谢动力学试验
《中国兽医杂志 》 2011 北大核心
摘要:为研究三苯双脒在绵羊体内动态变化的规律,采用方法如下:绵羊1次口服给药60、120、180 mg/kg体重3个剂量组,依据消除速率常数、吸收率常数、达峰时、血药浓度-时间曲线等主要药动学参数,经上海宏能软件有限公司开发的临床药物代谢动力学软件进行数据分析,符合血管外给药一级吸收一室模型,主要药动学参数为:吸收率常数Ka=0.15129h,t1/2Ka=4.74h,消除速率常数Ke=0.082 121h,t1/2Ke=8.46h,t1/2=19.03 h,达峰时tmax=8.0 h,Cmax=6257μg/L,血药浓度-时间曲线下面积AUC=300 51μg/L.h。三苯双脒肠溶片在羊体内吸收快、半衰期长等特点。说明三苯双脒肠溶片在药效试验剂量范围内比较安全。
玻璃化冷冻对绵羊卵母细胞中母源基因mRNA表达量的影响
《畜牧兽医学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要:为详细了解玻璃化冷冻对绵羊卵母细胞中母源基因mRNA表达量的影响,分别玻璃化冷冻GV期和IVM期(18、24h)绵羊卵母细胞,解冻后进行体外培养。GV期和IVM期卵母细胞经过冷冻-解冻后,卵裂率(10.37%、23.17%、33.07%)均极显著低于对照组(82.96%,P<0.01),且冷冻-解冻后的GV期卵母细胞卵裂率极显著低于冷冻-解冻后的IVM期卵母细胞(P<0.01)。本试验利用荧光实时定量PCR技术检测4种母源基因:Gdf9(生长分化因子-9)、Zar1(合子阻泄因子)、Mater(胚胎必要的母体抗原)、Dnmt1(DNA甲基化转移酶1)在不同处理后的绵羊卵母细胞中的mRNA含量。结果表明,4个基因的mRNA在GV期的表达量均高于IVM期的卵母细胞(P<0.01);经玻璃化冷冻处理后,4个基因的mRNA表达量升高,其中GV期含量最高(P<0.01)。结果提示,绵羊GV或IVM期卵母细胞玻璃化冷冻导致母源基因mRNA表达量升高,可能会对胚胎发育产生负面影响。

