科研产出
细粒棘球绦虫成虫蛋白的提取及特异性成分分析
《中国兽医科学 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：旨在获得特异性蛋白提取效果好的细粒棘球绦虫（Eg）成虫蛋白提取方法,采用7种方法提取Eg成虫蛋白,以ELISA、SDS-PAGE、Western-blot等检测方法比较各蛋白提取方法的提取效果,对7种蛋白提取物进行凝胶层析获得不同蛋白组分,经过ELISA、SDS-PAGE、Western-blot等检测各组分中特异性蛋白的含量,判断各提取方法的提取效果。结果表明,7种方法均能用于提取特异性蛋白;各蛋白提取物的ELISA、SDS-PAGE和Western-blot检测显示,PBS超声破碎蛋白中特异性蛋白含量较其他蛋白提取物高。凝胶层析和ELISA检测结果表明特异性蛋白分子质量较大。比较特异性组分占总蛋白的百分比发现,PBS液氮研磨蛋白、Tris-HCl超声破碎蛋白和PBS超声破碎蛋白中特异性组分较多。本研究通过分析结合物理化学7种方法提取蛋白,为寻找蛋白质组学标准物质提供了参考依据。
关键词： 棘球蚴病 细粒棘球绦虫 蛋白质组学 凝胶层析 特异性组分
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瘦素对西门塔尔牛屡配不孕的影响及与生殖激素相关性分析
《西南农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：【目的】为探究瘦素对西门塔尔牛屡配不孕的影响及瘦素与生殖激素的相关性。【方法】选取健康牛16头,屡配不孕牛3头,通过酶联免疫吸附法对产后恢复期、第1个发情期、第2个发情期和第3个发情期的血清中瘦素及相关生殖激素进行检测。【结果】（1）4个时期中健康组的LEP浓度均高于屡配不孕组的LEP浓度,且产后恢复期的健康组和屡配不孕组的瘦素浓度最高;（2）在健康组中,LEP与GnRH和E2显著正相关（r=0.447,r=0.535,P<0.05）,与PROG极显著正相关（r=0.615,P<0.01）。在屡配不孕组中,LEP仅与PROG显著正相关（r=0.574,P<0.05）正相关正相关正相关。【结论】LEP可能是影响西门塔尔牛屡配不孕的一个内分泌因素,LEP浓度不足可能导致西门塔尔牛屡配不孕,LEP与屡配不孕组的PROG呈正相关（P<0.05）,说明LEP影响PROG的合成及分泌,因此,检测LEP可为预防及治疗西门塔尔牛屡配不孕作出相关性指导,降低养牛业的经济损失。
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准噶尔荒漠3种典型植物群系植物多样性及其影响因素
《中国草地学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：以准噶尔荒漠3种典型植物群系为研究对象,通过野外调查取样和室内测定,并结合环境因子,分析比较准噶尔荒漠3种典型植物群系群落组成和多样性特征。结果表明:准噶尔荒漠3种典型植物群系共记录6科13属15种植物,物种多样性总体较低,藜科植物在荒漠植物中占比超过55%。在3种植物群系中,伊犁绢蒿群系的Shannon-wiener指数和Simpson指数最高,分别为1.09和0.56;白梭梭群系的Pielou指数和Simpson指数最低,分别为0.54和0.42;盐生假木贼群系的Pielou指数最高,为0.85。准噶尔荒漠植物群落物种组成和多样性受多种环境因子综合作用,影响伊犁绢蒿群系最主要的环境因子是土壤有机碳和全氮含量,影响白梭梭群系最主要的环境因子是年平均气温,影响盐生假木贼群系最主要的环境因子是年平均降水量和土壤pH值,在整个研究区域年平均气温、年平均降水量、纬度和土壤有机碳含量在所有环境因子中起主导作用。
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NaCl胁迫对野生苜蓿种子萌发特性的影响
《草原与草坪 》 2021 CSCD
摘要：以2种野生牧草杂花苜蓿（Medicago varia）和黄花苜蓿（M.falcata）为试验材料,测定了NaCl浓度0、50、100、150、200 mmol/L处理下种子的发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数和苗长、胚根长等萌发指标,分析2种野生牧草种子萌发期耐盐性变化规律。结果表明:1)NaCl胁迫对2种野生苜蓿种子发芽都产生了抑制作用,高浓度NaCl胁迫对黄花苜蓿发芽率影响大,且高浓度下黄花苜蓿的发芽率高于杂花苜蓿。2)NaCl浓度为0～50 mmol/L时黄花苜蓿的发芽势低于杂花苜蓿,100～200 mmol/L时高于杂花苜蓿。3)杂花苜蓿和黄花苜蓿种子发芽指数在100 mmol/L时均较对照下降50%。对照活力指数黄花苜蓿种子是杂花苜蓿种子的2倍。4)2种野生苜蓿种子在NaCl胁迫下胚芽长和胚根长表现出不同的下降规律,NaCl胁迫对黄花苜蓿胚芽长度下降较杂花苜蓿大,但杂花苜蓿的胚根长下降较黄花苜蓿大。利用隶属函数对2种野生牧草萌发期各指标综合评价得出:黄花苜蓿的耐盐性较杂花苜蓿强,可用于盐渍化土壤的建植。
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不同绒细度的西藏绒山羊皮肤组织miRNA分析与鉴定
《农业生物技术学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：微小核糖核酸（microRNA, miRNA）作为重要的基因调控元件,在多种哺乳动物皮肤及毛囊中均有表达,并在转录后水平调节皮肤和毛发的生长和发育过程。本研究旨在对西藏绒山羊（Capra hircus）皮肤组织miRNA进行分析与鉴定,探讨miRNA在绒毛纤维直径性状中可能发挥的作用及调控机制。分别选取细绒（平均纤维直径（12.04±0.03）μm）和粗绒（平均纤维直径（14.88±0.05）μm）的西藏绒山羊各4只,对肩胛部皮肤组织提取RNA建立文库进行高通量测序。对原始序列进行过滤,并与参考基因组（ARS1）比对;根据miRBase中已知miRNA和参考基因组中其他非编码RNA （non coding RNA, ncRNA）的位置信息,对miRNA和其他小RNA进行鉴定,筛选出不同绒毛细度的西藏绒山羊皮肤组织差异表达miRNA,并进行靶基因预测及功能分析;进一步利用qPCR验证5个miRNAs与测序结果的一致性。结果表明,每个样本至少获得20.09 M条原始读长,过滤后至少得到19.46 M条有效读长（clean reads）,共鉴定出426个已知miRNAs和119个新miRNAs;筛选获得12个差异表达miRNAs,其中5个miRNAs在细绒型西藏绒山羊皮肤组织中显著上调表达,7个miRNAs显著下调表达;差异表达miRNAs共预测到621个靶基因,KEGG分析显示靶基因富集到B细胞受体信号通路、FcεRI信号通路、T细胞受体信号通路等生物学通路中;同时,选取的5个miRNAs的qPCR验证结果与测序分析的表达趋势一致。本研究结果提示,西藏绒山羊的绒细度可能受不同miRNAs调控,这些miRNAs进一步影响靶基因的表达并参与调控不同的信号通路。本研究为深入揭示调控山羊绒细度的miRNAs和相关信号通路提供参考依据。
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碱基编辑系统研究最新进展及应用
《生物工程学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：CRISPR系统能够在基因组DNA中完成精准编辑,但依赖于细胞内的同源重组（Homologydirected recombination,HDR）修复途径,且效率极低。基于CRISPR/Cas9系统开发的碱基编辑技术（Base editing）通过将失去切割活性的核酸酶与不同碱基脱氨基酶融合,构建了两套碱基编辑系统（Baseeditors,BE）:胞嘧啶碱基编辑器（Cytosine base editor,CBE）和腺嘌呤碱基编辑器（Adenine base editor,ABE）。这两类编辑器分别能够在不产生DNA双链断裂的前提下在基因靶位点完成C>T （G>A）或A>G （T>C）的替换,最终实现精准的碱基编辑。目前碱基编辑技术已经广泛应用于基因治疗、动物模型构建、精准动物育种和基因功能分析等领域,为基础和应用研究提供了强大的技术工具。文中概括了碱基编辑技术的研发过程、技术优势、应用现状、存在问题及改进策略,以期为相关领域的科研人员了解和使用碱基编辑系统提供参考。
关键词： CRISPR/Cas9 碱基编辑 胞嘧啶碱基编辑器 腺嘌呤碱基编辑器
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羊脑包虫病CT、MRI影像特征
《畜牧兽医学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：本研究旨在观察羊脑包虫病CT、MRI的特征性影像学表现。选择3只表现出脑包虫病典型症状的新疆细毛羊进行神经学检查及血常规、血清生化检查。对其中2只羊头部进行CT和MRI扫查。最后进行病理剖检,观察病理解剖变化。动物神经学检查发现动物出现眼球震颤,双侧眼睑反射、角膜反射减弱,动物的翻正反应、双侧独轮车反应存在异常;血常规和血清生化检查结果无明显异常;CT影像可见颅内数量不等囊性低密度影,内部CT值与脑脊液相近,边界清晰,有占位效应,囊壁分布大量点状中等到高密度的原头节影像,其余脑组织未见明显异常密度影像。MRI影像可见颅内数量不等囊性病灶,T1WI低信号,T2WI高信号,与脑脊液信号相近,可见沿囊壁分布大量点状T1等信号,T2低信号的原头节影像,病灶周围未见明显异常信号。病理剖检可见充满澄清囊液的寄生虫包囊,内含有数量不等的原头节。寄生虫包囊位置与影像学检查结果一致。结果说明羊脑包虫病具有特征性的CT和MRI影像学表现,影像学诊断方法可准确定位寄生虫包囊数量和位置,显示病灶累及周围组织的情况,有助于手术治疗计划的制定。
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EgM123重组蛋白抗血清对多房棘球绦虫原头蚴体外发育的影响
《中国病原生物学杂志 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：目的探讨EgM123重组蛋白抗血清对多房棘球绦虫原头蚴体外发育的影响。方法采集新鲜活力强的多房棘球绦虫原头蚴,体外培养48 h,经1%亚甲基蓝染色计数,原头蚴存活率>90%,将原头蚴按150～200枚/孔加入24孔板。实验分三组:实验组pET41b-EgM123抗血清组和pET28a-EgM123抗血清组以及对照组,实验组设有50、100、200μl 3个不同剂量。按分组加入不同血清,于37℃、5%CO2培养箱中培养3～6 d,期间定时观察原头蚴存活情况,计算原头蚴死亡率。结果体外培养3 d,对照组的原头蚴死亡率为7.74%,pET41b-EgM123组（50、100、200μl）的原头蚴死亡率分别为35.56%、40.67%和62.98%,pET28a-EgM123组（50、100、200μl）的原头蚴死亡率分别为63.9%、85.84%和97.11%;培养6 d,对照组的原头蚴死亡率为7.2%,pET41b-EgM123组（50、100、200μl）的原头蚴死亡率分别为21.55%、26.21%和52.29%,pET28a-EgM123组（50、100、200μl）的原头蚴死亡率分别为80.98%、77.16%和98.64%。pET41b-EgM123和pET28a-EgM123抗血清与对照组相比,对原头蚴杀伤效果显著（P<0.01）,pET28a-EgM123抗血清与pET41b-EgM123相比,杀伤效果更显著（P<0.05）,抗血清浓度与原头蚴的被损伤程度和死亡率成正比。结论 EgM123抗血清对多房棘球绦虫原头蚴有杀伤作用,以pET28a-EgM123抗血清杀伤效果更显著,可能与抗血清介导的补体经典激活途径有关。
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多房棘球绦虫粪抗原双抗体夹心ELISA检测方法的建立
《动物医学进展 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：建立多房棘球绦虫粪抗原双抗体夹心ELISA检测方法,为犬感染多房棘球绦虫的早期诊断提供技术支撑.以5E10H5杂交瘤细胞株腹腔接种Balb/c鼠制备的腹水作为包被抗体,多房棘球绦虫成虫可溶性抗原免疫新西兰大白兔制备的多克隆抗体血清作为检测抗体,HRP标记的驴抗兔IgG作为二抗,建立双抗体夹心ELISA方法,检测试验犬(感染多房棘球绦虫)和阴性对照犬犬粪.结果显示,多房棘球绦虫成虫可溶性抗原具有良好的抗原性并能产生高效价抗体;对该方法的灵敏度进行检测,阳性粪样稀释至1:10000时仍显示为阳性;在感染动态分析中,该方法最早可在犬感染72 h后,最迟6 d后检测到多房棘球绦虫粪抗原.表明建立的方法可用于诊断犬多房棘球绦虫感染,为后期研制犬多房棘球绦虫粪抗原双抗体夹心ELISA检测试剂盒奠定了基础.
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围封对准噶尔荒漠植物和土壤恢复的影响(英文)
《资源与生态学报(英文版) 》 2021 CSCD
摘要：封育是恢复退化草地最常用的方法之一,然而封育在草地植物及土壤恢复中的作用尚存争议,尤其在荒漠中,为了进一步评估封育对荒漠植物和土壤性质的影响,本研究以准噶尔荒漠3种典型的植物群系为研究对象,应用高通量测序技术,系统分析了封育前后植物、土壤的差异。结果表明,3种荒漠植物群系的土壤有机碳、全氮和全磷含量封育后有一定的增降变化,但差异不显著;封育后伊犁绢蒿群系植物高度、盖度、地上生物量和物种丰富度分别提高了58.99%、59.35%、33.29%和51.21%;白梭梭群系分别提高了15.49%、33.52%、20.85%和5.13%;盐生假木贼群系分别提高了83.80%、31.51%、76.66%和33.33%。封育后3种植物群系细菌多样性也存在差异,其中伊犁绢蒿群系平均OTU数量和Shannon-Wiener指数显著增加了12.74%和2.92%;白梭梭群系平均OTU数量和Shannon-Wiener指数均显著升高了17.08%和3.17%;盐生假木贼群系平均OTU数量和Shannon-Wiener指数均封育后虽有高低变化,但差异不显著。封育显著增加了荒漠植物、土壤微生物多样性以及荒漠植物群系群落生产力,但封育后荒漠土壤养分含量有一定的增加,但差异不显著。这些研究表明,封育是恢复荒漠生态的有效方法,但可能对土壤养分的固存意义不大。
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