科研产出
重组酶介导等温核酸扩增技术检测伯氏疏螺旋体方法的建立
《中国兽医杂志 》 2021 北大核心
摘要：本试验采用重组酶介导等温核酸扩增（RAA）技术建立伯氏疏螺旋体核酸的检测方法。根据伯氏疏螺旋体16S rRNA基因保守序列设计并合成特异性RAA引物,采用重组酶介导扩增技术电泳法,以10倍系列稀释1 ng/μL伯氏疏螺旋体B31基因组DNA为模板进行RAA,测定该方法的敏感性。通过对大肠杆菌、沙门菌、钩端螺旋体基因组DNA扩增验证该方法的特异性。结果显示,该方法对伯氏疏螺旋体标准株的B31基因组DNA检测限约为100 fg/μL,对大肠杆菌、沙门菌、钩端螺旋体均无扩增,具有良好的特异性。RAA具有特异性高、检测快速、灵敏等优点,本研究建立的伯氏疏螺旋体RAA检测方法,为伯氏疏螺旋体临床样本的快速诊断提供依据。
全文链接
请求原文
小反刍兽疫核酸疫苗的制备及免疫效果评估
《黑龙江畜牧兽医 》 2021 北大核心
摘要：为了制备针对小反刍兽疫病毒（Peste des peties ruminants virus, PPRV）F基因的核酸疫苗,并评价其对小鼠的免疫效果,试验采用DNA重组技术将F基因、优化密码子后的F基因以及连接乙型脑炎病毒信号肽（JEVSP）的优化密码子后的F基因3个目的片段分别克隆到真核表达载体pcDNA3.1（+）,构建重组质粒pcDNA3.1（+）-F、pcDNA3.1（+）-F-opt和pcDNA3.1（+）-JEVSP-F-opt,大量培养重组质粒菌后,以碱裂解法将菌体悬浮裂解,经中空纤维切向流超滤和微滤浓缩处理,将制备的核酸疫苗以100μg/只的剂量给Balb/c小鼠肌肉注射免疫,共分为4组,pcDNA3.1（+）-F组、pcDNA3.1（+）-F-opt组、pcDNA3.1（+）-JEVSP-F-opt组和pcDNA3.1（+）空载体组,每隔14 d免疫1次,共免疫3次,每次免疫14 d后利用中和试验检测抗体水平。结果表明:成功制备核酸疫苗pcDNA3.1（+）-F、pcDNA3.1（+）-F-opt和pcDNA3.1（+）-JEVSP-F-opt,免疫Balb/c小鼠14 d后pcDNA3.1（+）空载体免疫组中和抗体阳性率为0,pcDNA3.1（+）-F组、pcDNA3.1（+）-F-opt组、pcDNA3.1（+）-JEVSP-F-opt组抗体转阳性,且pcDNA3.1（+）-F-opt组、pcDNA3.1（+）-JEVSP-F-opt组抗体水平呈逐渐增加的趋势。说明成功制备小反刍兽疫核酸疫苗,并且能在小鼠上产生抗体。
关键词： 小反刍兽疫 F基因 核酸疫苗 制备工艺 浓缩 免疫水平
全文链接
请求原文
北山羊与绒山羊杂交F1代DQA1基因外显子2多态性与CDS区生物信息学分析
《黑龙江畜牧兽医 》 2021 北大核心
摘要：为了解北山羊杂交后代DQA1基因序列特征,以及DQA1基因多态性与血液免疫性状的关系,筛选出用于北山羊杂交后代抗病育种的遗传标记,试验通过PCR扩增和测序获得了北山羊与家养绒山羊杂交F1代DQA1基因CDS区,并对CDS区编码蛋白进行了生物信息学预测分析,同时采用限制性片段长度多态性（RFLP）分析DQA1基因外显子2的多态性,并与血液免疫性状进行了相关分析。结果表明:杂交F1代DQA1基因外显子2经AluⅠ酶切后共检出3种基因型,其中AC型白细胞和淋巴细胞数量显著高于BB型（P<0.05）,AB型血红蛋白浓度显著高于BB型（P<0.05）;DQA1基因CDS区长度为768 bp,编码255个氨基酸,表现为弱的亲水性,第23,24位氨基酸存在信号肽剪切位点,第218～240位有一个典型的跨膜螺旋区,二级结构主要由α-螺旋（16.08%）、β-折叠（25.49%）和无规卷曲（58.43%）组成。说明DQA1基因AC基因型与血液白细胞和淋巴细胞总数具有一定的相关性,其编码蛋白的生物信息学预测与其功能相一致,可作为抗病育种的遗传标记。
关键词： 北山羊 绒山羊 杂交F1代 DQA1 多态性 蛋白序列分析 生物信息学
全文链接
请求原文
马乳脂肪球膜蛋白组鉴定及潜在功能分析
《中国畜牧兽医 》 2021 北大核心
摘要：试验旨在研究马乳脂肪球膜（milk fat globule membrane, MFGM）蛋白组成及潜在的生物学功能。选取12匹5岁左右、平均体重为450～500 kg的健康纯血母马作为试验动物,主要饲喂干牧草,所有马匹饲养和管理条件均相同。将12份样品以每组4份进行混合,分离提取产后第60天马乳中MFGM蛋白,进行高分辨质谱仪鉴定和生物信息学分析。结果显示,马MFGM组分中共鉴定出310种表达蛋白,这些蛋白主要参与的生物过程为生物调节、刺激应答、定位、多细胞生物过程、运输、信号、细胞通讯、发育过程、细胞分化和免疫系统过程等;细胞成分主要为胞外区域、膜、囊泡、核仁和线粒体等;分子功能主要为催化活性、蛋白质结合、碳水化合物衍生物结合和小分子结合等。KEGG通路分析表明,MFGM蛋白主要参与血小板活化通路、内吞、脂肪酸生物合成和Ras信号通路等。马乳MFGM蛋白的蛋白质互作网络分析图中共包含215种蛋白质。本研究结果揭示了马乳MFGM蛋白质组的复杂性,为解析其营养和生物学功能提供了科学数据。
全文链接
请求原文
西北荒漠绿洲区紫花苜蓿土壤有效磷丰缺指标与推荐施磷量
《中国草地学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：采用零散实验数据整合法和养分平衡-地力差减法,开展了西北荒漠绿洲区苜蓿测土施磷系统研究,以期为我国西北荒漠绿洲区紫花苜蓿测土施肥奠定科学基础。结果表明,我国西北荒漠绿洲区苜蓿土壤有效磷第1～7级丰缺指标依次为≥46mg/kg、20～46mg/kg、9～20mg/kg、4～9mg/kg、2～4mg/kg、1～2mg/kg和<1mg/kg;当目标产量为12～27t/hm2、磷素利用率20%时,第1～7级土壤之推荐施磷量分别为0、36～81kg/hm2、72～162kg/hm2、108～243kg/hm2、144～324kg/hm2、180～405kg/hm2和216～486kg/hm2。
全文链接
请求原文
干旱胁迫对玉米杂交种产量及穗部性状的影响
《玉米科学 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：采用开花期自然干旱胁迫法,对自育的107个杂交组合进行耐旱性鉴定评价。结果表明,干旱对杂交种产量影响较大。旱区产量较水区下降48.24%,下降极显著。穗长和行粒数对干旱反应较敏感,行粒数的下降幅度大于穗长,分别为15.07%和9.84%。水区和旱区的产量、穗长、行粒数、穗粗、穗行数均呈极显著相关,相关系数分别为0.39、0.65、0.39、0.38和0.86。筛选17HT1079×PH4CV、17HT935×PH4CV、17HT1028×PH4CV和新玉108这4个杂交种,旱区产量分别为11 654.5、8 186.4、8 431.5、7 731.7 kg/hm2,较先玉335增产67%、17.31%、20.82%和10.79%,增产极显著。水区产量分别为14 365.5、16 006.8、13 928.8和14 985.9 kg/hm2,较先玉335增产3.61%、15.45%、0.46%和8.09%。抗旱系数分别为0.81、0.51、0.61和0.52,耐逆指数分别为1.3、1.01、0.91和0.9,极显著高于先玉335,均属一级极强耐旱杂交种。
全文链接
请求原文
细粒棘球绦虫成虫蛋白的提取及特异性成分分析
《中国兽医科学 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：旨在获得特异性蛋白提取效果好的细粒棘球绦虫（Eg）成虫蛋白提取方法,采用7种方法提取Eg成虫蛋白,以ELISA、SDS-PAGE、Western-blot等检测方法比较各蛋白提取方法的提取效果,对7种蛋白提取物进行凝胶层析获得不同蛋白组分,经过ELISA、SDS-PAGE、Western-blot等检测各组分中特异性蛋白的含量,判断各提取方法的提取效果。结果表明,7种方法均能用于提取特异性蛋白;各蛋白提取物的ELISA、SDS-PAGE和Western-blot检测显示,PBS超声破碎蛋白中特异性蛋白含量较其他蛋白提取物高。凝胶层析和ELISA检测结果表明特异性蛋白分子质量较大。比较特异性组分占总蛋白的百分比发现,PBS液氮研磨蛋白、Tris-HCl超声破碎蛋白和PBS超声破碎蛋白中特异性组分较多。本研究通过分析结合物理化学7种方法提取蛋白,为寻找蛋白质组学标准物质提供了参考依据。
关键词： 棘球蚴病 细粒棘球绦虫 蛋白质组学 凝胶层析 特异性组分
全文链接
请求原文
不同饲喂水平对20~35kg多胎萨福克羊母羊生长、屠宰性能及器官指数的影响
《黑龙江畜牧兽医 》 2021 北大核心
摘要：为了研究不同饲喂水平对20～35 kg多胎萨福克羊母羊生长性能、屠宰性能及各组织器官的影响,试验采用饲养试验与比较屠宰试验相结合的方法,以15只断奶后3月龄健康纯种多胎萨福克羊母羊为试验对象,将其随机分成3组,分别为自由采食组（AL组）、70%限饲组（IR70组）、40%限饲组（IR40组）,每组5只。进入试验后,记录试验羊的生长性能指标;当AL组试验羊平均体重达到35 kg时,屠宰全部试验羊,测定屠宰性能及各胃室、重要组织及内脏器官的增重与发育情况。结果表明:AL组、IR70组及IR40组的净增重、平均日增重和平均干物质采食量这3个指标变化规律趋于一致,即AL组>IR70组>IR40组,且3组间差异显著（P<0.05）;随着饲喂水平的升高,试验羊宰前活重、空腹体重、胴体重、屠宰率、骨重都表现出相同规律,即随着饲喂水平的升高而增加,IR40组骨肉比最高,不同饲喂水平3组间试验羊净肉率差异不显著（P>0.05）;各胃室的重量随着饲喂水平的升高而增加,AL组瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃重量最高,瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃重量占复胃总重比例3组间差异不显著（P>0.05）;AL组心脏、肝脏、肺脏、肾脏重量显著高于IR70组和IR40组（P<0.05）。说明随着饲喂水平的升高,在自由采食状态、代谢能为10.36kJ/kg,粗蛋白为16.45%的营养水平时可以使母羊日增重达到300 g/d;饲喂水平对20～35 kg多胎萨福克羊母羊各胃室的重量和发育、主要内脏器官的发育具有不同程度的影响。
关键词： 多胎萨福克羊母羊 饲喂水平 生长性能 屠宰性能 器官指数
全文链接
请求原文
应用康奈尔净碳水化合物-蛋白质体系评定新疆库鲁斯台草原春草场典型牧草的营养价值
《饲料研究 》 2021 北大核心
摘要：试验采用康奈尔净碳水化合物-蛋白质体系(CNCPS)评定新疆库鲁斯台草原春草场典型牧草的营养价值.从新疆塔城库鲁斯台草原春草场采集11种典型牧草,通过CNCPS中碳水化合物和蛋白质的分类方法,测定牧草中相应的营养成分,并进行分类分析.结果显示,从结构碳水化合物的可利用性方面比较,燕麦草质量最好,羊草和艿艿草次之,苔草较差.从非结构碳水化合物的含量比较,蒲公英草最好,娟蒿和盐豆木次之,燕麦草、羊草和艿艿草较差.从真蛋白质含量及可利用性方面比较,旱麦草、苦豆子、苔草、樟味藜、艿艿草、赖草和盐豆木质量较好,羊草、蒲公英、娟蒿和燕麦草较差.在实际生产中,需要对每种草料的营养价值进行分析和合理利用,提高草料的使用价值.
全文链接
请求原文
几种布鲁氏菌ELISA抗体试剂盒对牛血清的临床检测评价
《中国兽医杂志 》 2021 北大核心
摘要：为了评价目前市面流通的部分ELISA布鲁氏菌病（简称"布病"）抗体检测试剂盒对牛血清的检测效果,本试验采集了不同地区的牛血清样品300份,应用虎红平板凝集试验（RBT）及试管凝集试验（SAT）进行了布病抗体阴阳性确诊后,用不同厂家的ELISA试剂盒开展了比对试验。结果表明,4种iELISA布病抗体检测试剂盒的敏感性在97.9%～100.0%,特异性介于18.2%～27.3%,总体符合率在74.3%～77.1%,两两试剂盒检测结果之间的Kappa值分布在0.707～0.916。5种cELISA布病抗体检测试剂盒的敏感性在95.8%～100.0%,特异性介于22.7%～81.8%,总体符合率在74.3%～92.9%,两两试剂盒检测结果之间的Kappa值分布在0.394～0.972。本研究结果表明,不同厂家的ELISA试剂盒的检测结果存在差异性,这将为布鲁氏菌病的临床确诊提供了数据基础。
关键词： 布鲁氏菌 布鲁氏菌病 牛 iELISA cELISA 评价
全文链接
请求原文
