科研产出
禽流感病毒新疆株A/Duck/XJ/4(H5N1)的PB1、PB2和PA基因测序及进化分析
《山东农业大学学报(自然科学版) 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：通过RT-PCR技术对禽流感病毒新疆株A/Duck/X J/4(H5N1)的PB1、PB2和PA基因分别进行了扩增及克隆,测序结果表明该毒株的PB2、PB1和PA基因全长核苷酸序列分别为2341 bp、2282 bp和2187 bp。同源性分析表明A/Duck/X J/4(H5N1)株与禽源、野生鸟类和猪源的禽流感毒株均有很高的同源性(86.3%~99.6%)。与人源毒株相比,PB2和PA与A/HK/156/97(H5N1)株的同源性较低(86.3%~88.7%);与A/V ietnam/CL01/2004(H5N1)株和A/hum an/Zhejiang/16/2006(H5N1)株的同源性较高(93.0%~98.8%);PB1与人源毒株A/HK/156/97(H5N1)、A/V ietnam/CL01/2004(H5N1)、A/hum an/Zhejiang/16/2006(H5N1)同源性为91.1%~93.2%。
关键词： 禽流感病毒 PB1、PB2和PA基因 RT-PCR 序列分析
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新引1号东方山羊豆的选育与利用
《中国草地学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：1999年1月和12月分别从哈萨克斯坦和俄罗斯引入东方山羊豆种质,1999~2004年的试验研究结果表明:新引1号东方山羊豆干草产量达15525.8kg/hm2,初花期粗蛋白质含量23.88%,氨基酸含量14.17%,种子产量225.1kg/hm2;鲜、干草各类家畜均喜食,分枝期和初花期单宁含量分别为0.02%和0.93%,反刍家畜青饲不会发生臌胀病;种子粒径10~12目,批量种子如混杂菟丝子种子(粒径14~16目)易清选;在积雪覆盖地区-25~-45℃低温下可安全越冬,抗病虫害能力强,适宜在我国干旱、半干旱地区推广种植。
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新疆塔里木盆地两河流域野生麻资源调查
《草业科学 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：麻具有药用、轻纺、保健、造纸、制作药烟、蜜源等多种经济价值。新疆塔里木盆地两河(叶尔羌河、塔里木河)流域是野生麻(大叶白麻Poacynum hendersonii、白麻P.pictum、罗布麻Apocynum venetum)的主要产区,其中大叶白麻分布广,面积大,储量多。按有关分类方法,将野生麻资源划分为6个群系12个群丛。野生麻分布面积23.56万hm2,有麻面积18.12万hm2,其中大叶白麻占99.51%;白麻占0.49%。鲜麻总产量59.35万t,折合干麻总产量24.41万t。为更好的利用野生麻资源,在对其种类、分布、面积、生物量调查的基础上,对麻的开发前景、野生麻田的保护管理及改良培育、人工麻田的建立、科技攻关5个方面提出了建议。
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绵羊包虫病基因工程疫苗(Eg95)免疫试验
《中国人兽共患病学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：目的验证绵羊包虫病基因工程疫苗(Eg95)对新疆羊源棘球蚴病预防效果。方法应用新西兰农牧科学院沃勒斯维尔动物研究中心提供的绵羊包虫病基因工程疫苗(Eg95),对新生新疆细毛羊、巴音布鲁克羊、山羊羔羊进行二免、三免、四免,以间接ELISA法作血清抗体动态检测,在免疫42d、180d、365d、730d进行人工感染,于感染后180d剖解试验羊;试验羊二免后在包虫病的高发区放牧饲养180d、365d730d后剖解试验羊,检查免疫组与对照组羊的肝脏和肺脏荷囊数量,统计保护率(减囊率)。结果1.Eg95有体征反应,属于正常疫苗反应;2.免疫组与对照组血清IgG的OD值之比?2;3.二免后42d,人工感染的保护率:新疆细毛羊90.5%,山羊100%;4.二免后180d,人工感染的保护率:新疆细毛羊94.6%,山羊82.2%;自然感染的保护率:新疆细毛羊88.1%,巴音布鲁克羊83.6%。5.二免后365d,人工感染的保护率:新疆细毛羊97.4%;自然感染的保护率:新疆细毛羊83.6%,巴音布鲁克羊83.3%。6.二免后730d,人工感染的保护率:新疆细毛羊86.%;自然感染的保护率:87.1%;7.三免后180d,人工感染的保护率:新疆细毛羊99.2%。8.三免后365d,人工感染的保护率:新疆细毛羊95.6%,自然感染的保护率95.1%。9.四免后365d,人工感染的保护率:新疆细毛羊97.7%,自然感染的保护率95.5%。结论Eg95对新疆羊源棘球蚴病具有预防作用,免疫程序为新生羊羔初次2次,间隔期1个月(或4周),其后每年加强一次。
关键词： 包虫病 基因工程疫苗 免疫 新疆细毛羊 巴音布鲁克羊 山羊
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我国部分地区牛轮状病毒的病原学调查及一株G10P[11]型牛轮状病毒的分离鉴定
《中国预防兽医学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：应用轮状病毒RNA电泳方法,对内蒙古、黑龙江、新疆、北京、安徽等地共90份犊牛腹泻粪便样品进行检测。在内蒙古和新疆采集的粪样中共检出11份轮状病毒阳性样品,平均阳性率为12%(11/90)。阳性样品经RT-PCR分型鉴定,新疆2份和内蒙古5份样品属于G10型,新疆另一牛场的4份样品属于G6型。对所有阳性样品进行病毒分离,获得1株能在MA104细胞上稳定传代的病毒株,经鉴定该分离株属于G10P[11]型轮状病毒,命名为HM26。G10型牛轮状病毒的分离在国内尚属首次。
应用SSH技术研究H_2O_2胁迫下细粒棘球蚴基因的表达
《中国人兽共患病学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：目的构建H2O2胁迫下细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus)与正常组织差异表达的消减cDNA文库。方法以H2O2胁迫细粒棘球蚴cDNA为试验方(tester),正常生长的细粒棘球蚴cDNA为驱动方(driver),应用抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH)研究H2O2胁迫下细粒棘球蚴基因的表达。结果文库扩增后得到124个阳性克隆,菌落PCR分析,均得到200~1000bp插入片段。将整个文库克隆进行测序,测得序列结果利用BLAST在线软件与GenBank数据库进行同源序列比对分析和BlastX分析。结果获得重要基因的cDNA序列,如氧化还原酶、蛋白激酶、生长因子等。另有部分克隆在GenBank中无法查到对应的同源基因,可能代表了新基因。结论成功构建了H2O2胁迫与正常组织差异表达的消减cDNA文库,为研究细粒棘球蚴在抗氧化过程中的相关靶基因筛选奠定基础。
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禽流感病毒新疆株A/Duck/XJ/4的M基因的序列分析
《新疆农业科学 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：利用RT-PCR技术对禽流感病毒新疆株A/Duck/XJ/4的M基因进行了扩增与克隆,得到了全长核苷酸序列为1 016 bp的M基因,序列分析表明,M基因最大的开放阅读框位于19~1 000碱基;M1蛋白位于19~777碱基,编码252个氨基酸。M2蛋白位于19~44碱基和733~1 000碱基,编码97个氨基酸。同源性分析显示,A/Duck/XJ/4株M基因的核苷酸序列和氨基酸序列与所选H5N1亚型的参考毒株以及所选不同HA亚型的参考毒株均有很高的同源性。
细粒棘球绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶基因的克隆、表达及鉴定
《中国人兽共患病学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：目的克隆细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)硫氧还蛋白过氧化物酶(thioredoxin peroxidase TPx)基因,构建原核表达载体,通过诱导表达,纯化融合蛋白抗原,免疫小鼠制备抗血清。方法从包囊中分离原头蚴,抽提总RNA,采用RT-PCR的方法扩增EgTPx基因,克隆到原核表达载体pET-41b中,转化大肠杆菌BL21,经过IPTG诱导目的基因表达,SDS-PAGE对表达蛋白进行分析,通过谷胱甘肽Sepharose4B层析柱分离纯化获得重组蛋白并免疫小鼠,制备抗血清。Western blot鉴定抗血清的特异性,ELISA测定抗体的效价。结果用PCR方法扩增获得的EgTPx基因长度为582bp,经酶切鉴定和序列测定,插入到原核表达载体的基因片段为EgTPx基因,SDS-PAGE结果显示表达融合蛋白相对分子质量约为54kDa,鼠抗EgTPx抗体能与融合蛋白和天然原头蚴抗原发生特异性反应;间接ELISA法测定该抗体效价为1∶256000。结论成功地制备了鼠抗EgTPx抗体,并能够特异识别原核表达的融合蛋白EgTPx和天然原头蚴抗原,为研制有效的包虫病疫苗及相关诊断试剂盒奠定了基础。
关键词： 细粒棘球绦虫 硫氧还蛋白过氧化物酶 融合蛋白 抗血清
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新疆集约化奶牛场隐性乳房炎流行病学和病原学研究
《新疆农业科学 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：对分布于南北疆的4个集约化奶牛场进行了隐性乳房炎发病情况和病原学研究。通过对不同牛场采集的1 578份奶样的检测,发现隐性乳房炎平均头阳性率为64.75%,乳区阳性率为36.6%。对两个牛场跟踪检测,不同牛场隐性乳房炎高发季节不同;在4个乳区中,右侧前乳区和左侧后乳区阳性率高于其它两个乳区;21.6%~28.5%的被检牛为一个乳区阳性,33.2%~45.6%的被检牛呈多个乳区阳性。隐性乳房炎阳性奶样的细菌分离和生化实验表明,感染细菌种类主要为葡萄球菌(45.31%)、链球菌(34.15%)和大肠杆菌(11.9%);其中金黄色葡萄球菌分离率为29.93%、无乳链球菌为18.09%、停乳链球菌为12.83%,25.3%的奶样为混合感染,其中以葡萄球菌和链球菌的混合感染比例最高。对所分的3种菌进行小白鼠致病性实验,50%的实验菌株对小鼠无致病性。
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多头蚴病保护性基因的分离与表达
《中国人兽共患病学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：目的分离与表达多头绦虫(Taenia multiceps)基因45m,确定其免疫原性及在虫体不同发育阶段的表达。方法通过对绦虫同源基因序列分析设计引物,运用RT-PCR的方法,首次从绵羊多头绦虫的幼虫阶段分离到新的基因45m,将其克隆到pET41b表达载体中,获得了含正确读码框的重组质粒,将表达蛋白初步运用于动物免疫试验。结果45m基因长度为698bp,编码232个氨基酸。表达的重组蛋白分子量约为63kD,表达产量可达100~120mg/L。其蛋白序列与已知抗羊带绦虫(45W)和牛带绦虫保护性抗原的同源性分别为89%和85%。本动物绵羊的免疫接种试验表明该蛋白可有效激起机体的抗原抗体反应,其抗血清可以与多头绦虫的成虫和幼虫抗原总蛋白在63kD处发生特异性反应。结论45m蛋白可能具有较强抗原性,该蛋白在虫体的成虫和幼虫阶段均有表达,推测认为45m可能成为多头蚴病的候选疫苗。
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