科研产出
结核分枝杆菌三价DNA疫苗在奶牛体内诱导的免疫应答
《新疆农业科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：【目的】研究结核分枝杆菌Ag85B、MPB64和MPT83抗原DNA疫苗在奶牛体内诱导的免疫应答。【方法】以PJW4303为载体,构建上述3种抗原基因的三价DNA疫苗,免疫6月龄荷斯坦奶牛3次。ELISA法检测免疫奶牛的特异性抗体滴度。利用双抗夹心ELISA定量测定免疫奶牛各月IFN-γ浓度。【结果】免疫前奶牛体内特异性抗体为阴性,1免2、免后抗体效价上升较缓,3免后抗体效价上升快。MPT83特异性抗体上升最快,抗体效价1∶3 200持续6个月;Ag85B特异性抗体效价1∶3 200持续2个月;MPT64特异性抗体效价较低。免疫奶牛中MPT83、Ag85B、MPT64三种蛋白诱导产生IFN-γ在3免后6个月到达最高,浓度分别为(1 098.95±165.03)(、711.45±110.43)(、355.06±72.76)pg/mL,阴性对照组PBS刺激IFN-γ浓度为(114.5±27.46)pg/mL。阴性对照与三种抗原相比,差异均极显著(P<0.01)。【结论】多价核酸疫苗能同时诱导机体产生细胞免疫应答和体液免疫应答,可能有利于增强疫苗对抗结核病的抗性。
关键词： 结核分枝杆菌 Ag85B MPB64 MPT83 DNA疫苗 免疫应答
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布鲁氏菌PCR鉴定方法的研究与应用
《中国人兽共患病学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：目的采用PCR、PCR-SSCP方法对布鲁氏菌进行快速鉴定,并对其种、型鉴别。方法分析已发表布鲁氏菌属、种、型基因序列,寻找出不同布鲁氏菌的种、型特异性碱基分布规律,设计特异性引物,用于布鲁氏菌属、种、型的鉴定;根据聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析原理,建立PCR-SSCP方法,用于区分牛种A19疫苗株与其他型布鲁氏菌。结果所建立的PCR方法能高效、准确鉴定出布鲁氏菌,并能对其种、型进行区分;PCR-SSCP方法可将A19疫苗株从其他型布鲁氏菌中区分出来。结论利用PCR、PCR-SSCP方法能快速、准确地进行布鲁氏菌属、种、型以及疫苗株A19的鉴别,且简便、可靠,便于临床应用。
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鸡新城疫病毒新疆分离株F基因遗传进化分析
《动物医学进展 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：对2株分离自新疆乌鲁木齐市的鸡源新城疫病毒F基因进行了扩增、序列测定和分析。结果显示,该2株新城疫病毒F基因核苷酸序列长度分别为1 586bp和1 654bp,分別编码520和545个氨基酸;氨基酸裂解位点的序列均为112R-R-Q-K-R-F117,具备了基因Ⅶ型强毒株的特征;同源性分析表明,该2株新城疫病毒分离株与现用疫苗毒株的同源性在81.8%～84.2%之间,与国内外流行的基因Ⅶ型新城疫病毒同源性在87.4%～98.2%之间,与基因Ⅶd亚型新城疫病毒株的同源性较高,为94.4%～98.2%;遗传进化分析表明,该2个毒株与FJ882014-LN、FJ608335-XJ、FJ80805-JL等国内流行的基因Ⅶd亚型新城疫病毒株在一个分支内亲缘关系最近。
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克州地区天然草地生产力评价
《草业科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：本研究以克孜勒苏柯尔克孜自治州的天然草地为研究对象,利用2005年7-8月的MODIS遥感数据提取植被指数(NDVI),通过典型区野外实地采样,得到与MODIS影像资料时相一致的草地地上生物量数据,分析遥感植被指数与植被生物量的相关关系,建立了生物量估测模型,并进一步对克州天然草地生产力进行了评价。根据关键场理论计算了克州地区理论载畜量以及关键场载畜量。结果表明,克州地区的实际载畜量为263.19万羊单位,理论载畜量为177.61万羊单位,超载率为48.18%,关键场载畜量为113.71万羊单位,克州实际超载率为131.45%,远远高于理论超载率。
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葡萄藤秆资源的开发及饲养试验
《饲料工业 》 2011 北大核心
摘要：开发废弃的葡萄藤秆资源,加工调制后,作为粗饲料的一部分,用于全混合日粮中,对周岁绵羊进行30 d的饲养试验。在葡萄藤秆添加比例为15%或20%时,取得了日增重300 g左右的好成绩,为葡萄藤秆饲料资源的推广应用打下了良好的基础。
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牛结核杆菌DNA疫苗的纯化工艺研究及质量鉴定
《中国畜牧兽医 》 2011 北大核心
摘要：为获得纯度较高,能进行动物免疫试验的DNA疫苗,在高密度发酵工程菌的基础上,通过传统的碱裂解,获得粗提的质粒;用氯化钙去除裂解液中的大部分RNA,并用Sartobran P囊式过滤器获得了澄清的溶液。用聚乙二醇法沉淀超螺旋质粒DNA,去除大部分菌体蛋白和宿主DNA。最后用source 30Q阴离子交换色谱填料去除几乎全部的内毒素并浓缩了质粒。本试验纯化的DNA疫苗经质量检验达到了转染动物的要求。该工艺实现了一步色谱纯化DNA疫苗的目的,具有工艺简单、快速的优点。
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不同气调包装牛肉贮藏过程中肉质变化规律研究
《动物医学进展 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：研究不同气调包装方法对保存期间的牛肉品质的影响,探索适宜新疆地区生鲜冷却牛肉保鲜的包装方法。将宰后的牛肉采用5种不同的气调包装放在4℃条件保存,对牛肉保鲜效果进行研究,测定分析理化、菌落总数、色泽等主要指标。结果表明,在不同气调包装条件下,贮藏过程中牛肉样品的理化指标变化和微生物繁殖情况不同,气调包装C组的牛肉在保持较好肉色的情况下,其挥发性盐基氮(TVB-N)、pH、菌落总数在24 d之内依然能保持较低水平。说明气调包装对冷却牛肉的保鲜效果较好,能够明显延长牛肉的货架期。
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EgM9免疫犬引起细胞因子表达的变化规律研究
《动物医学进展 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：用重组表达蛋白EgM9免疫犬,通过实时定量PCR方法检测IFN-γ和IL-4表达的变化规律。用Trizol试剂提取新鲜全血的总RNA,取0.5μg总RNA,采用实时定量PCR法逆转录扩增IFN-γI、L-4和内参基因G3PDH,扩增产物经电泳分离后,用凝胶图像分析仪照相和扫描分析,检测其相对表达量。IFN-γI、L-4和G3PDH分别在202、3162、82 bp处出现明显条带,与GenBank查阅的基因条带大小基本一致;0、6、10、15周表达量依次升高,在15周时最高,IFN-γ尤为明显,它的变化始终大于IL-4。EgM9免疫犬后,能激起犬体内很强的细胞免疫和体液免疫反应,而且细胞免疫处主导地位。实时定量PCR方法为犬感染细粒棘球绦虫及其他疾病的早期诊断和流行病学调查提供了初步依据。
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结核分枝杆菌三价DNA疫苗的体液免疫与细胞免疫应答
《中国兽医科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：为研究结核分枝杆菌Ag85B、MPT64和MPT83抗原DNA疫苗在奶牛体内诱导的免疫应答,以PJW4303为载体,构建了上述3种抗原基因的三价DNA疫苗。采用阴离子交换色谱方法提取3种质粒,混合后添加佐剂DDA免疫3月龄荷斯坦奶牛3次,采用ELISA法检测免疫奶牛的特异性抗体效价。利用双抗夹心ELISA定量测定免疫奶牛各月的IFN-γ浓度。结果显示,纯化后的DNA疫苗经质量检验达到动物免疫试验的要求;免疫前奶牛体内特异性抗体为阴性;三免后第30天MPT83、Ag85B和MPT64特异性抗体效价达到最高,均值分别为1∶3 200、1∶2 560和1∶2 880;同时免疫奶牛MPT83、Ag85B、MPT64三种蛋白诱导产生的IFN-γ在三免后第30天达到最高,分别为(630.25±94.45)、(341.65±76.75)、(51.38±9.80)pg/mL,阴性对照组PBS的IFN-γ浓度为(6.48±20.88)pg/mL。每个月的阴性对照与3种抗原相比,差异均极显著(P<0.01)。证实该三价核酸疫苗能同时诱导机体产生细胞免疫应答和体液免疫应答,可能有利于增强疫苗对结核病的抗性。
关键词： 结核分枝杆菌 阴离子交换色谱 DNA疫苗 免疫应答
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