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布鲁氏菌PCR鉴定方法的研究与应用

中国人兽共患病学报 2011 北大核心 CSCD

摘要:目的采用PCR、PCR-SSCP方法对布鲁氏菌进行快速鉴定,并对其种、型鉴别。方法分析已发表布鲁氏菌属、种、型基因序列,寻找出不同布鲁氏菌的种、型特异性碱基分布规律,设计特异性引物,用于布鲁氏菌属、种、型的鉴定;根据聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析原理,建立PCR-SSCP方法,用于区分牛种A19疫苗株与其他型布鲁氏菌。结果所建立的PCR方法能高效、准确鉴定出布鲁氏菌,并能对其种、型进行区分;PCR-SSCP方法可将A19疫苗株从其他型布鲁氏菌中区分出来。结论利用PCR、PCR-SSCP方法能快速、准确地进行布鲁氏菌属、种、型以及疫苗株A19的鉴别,且简便、可靠,便于临床应用。

关键词: 布鲁氏菌 鉴定 PCR PCR-SSCP

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鸡新城疫病毒新疆分离株F基因遗传进化分析

动物医学进展 2011 北大核心 CSCD

摘要:对2株分离自新疆乌鲁木齐市的鸡源新城疫病毒F基因进行了扩增、序列测定和分析。结果显示,该2株新城疫病毒F基因核苷酸序列长度分别为1 586bp和1 654bp,分別编码520和545个氨基酸;氨基酸裂解位点的序列均为112R-R-Q-K-R-F117,具备了基因Ⅶ型强毒株的特征;同源性分析表明,该2株新城疫病毒分离株与现用疫苗毒株的同源性在81.8%~84.2%之间,与国内外流行的基因Ⅶ型新城疫病毒同源性在87.4%~98.2%之间,与基因Ⅶd亚型新城疫病毒株的同源性较高,为94.4%~98.2%;遗传进化分析表明,该2个毒株与FJ882014-LN、FJ608335-XJ、FJ80805-JL等国内流行的基因Ⅶd亚型新城疫病毒株在一个分支内亲缘关系最近。

关键词: 新城疫病毒强毒 F基因 序列分析 新疆株

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克州地区天然草地生产力评价

草业科学 2011 北大核心 CSCD

摘要:本研究以克孜勒苏柯尔克孜自治州的天然草地为研究对象,利用2005年7-8月的MODIS遥感数据提取植被指数(NDVI),通过典型区野外实地采样,得到与MODIS影像资料时相一致的草地地上生物量数据,分析遥感植被指数与植被生物量的相关关系,建立了生物量估测模型,并进一步对克州天然草地生产力进行了评价。根据关键场理论计算了克州地区理论载畜量以及关键场载畜量。结果表明,克州地区的实际载畜量为263.19万羊单位,理论载畜量为177.61万羊单位,超载率为48.18%,关键场载畜量为113.71万羊单位,克州实际超载率为131.45%,远远高于理论超载率。

关键词: 草地生产力 监测模型 载畜量 关键场

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不同气调包装牛肉贮藏过程中肉质变化规律研究

动物医学进展 2011 北大核心 CSCD

摘要:研究不同气调包装方法对保存期间的牛肉品质的影响,探索适宜新疆地区生鲜冷却牛肉保鲜的包装方法。将宰后的牛肉采用5种不同的气调包装放在4℃条件保存,对牛肉保鲜效果进行研究,测定分析理化、菌落总数、色泽等主要指标。结果表明,在不同气调包装条件下,贮藏过程中牛肉样品的理化指标变化和微生物繁殖情况不同,气调包装C组的牛肉在保持较好肉色的情况下,其挥发性盐基氮(TVB-N)、pH、菌落总数在24 d之内依然能保持较低水平。说明气调包装对冷却牛肉的保鲜效果较好,能够明显延长牛肉的货架期。

关键词: 气调包装 菌落总数 理化指标 牛肉

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EgM9免疫犬引起细胞因子表达的变化规律研究

动物医学进展 2011 北大核心 CSCD

摘要:用重组表达蛋白EgM9免疫犬,通过实时定量PCR方法检测IFN-γ和IL-4表达的变化规律。用Trizol试剂提取新鲜全血的总RNA,取0.5μg总RNA,采用实时定量PCR法逆转录扩增IFN-γI、L-4和内参基因G3PDH,扩增产物经电泳分离后,用凝胶图像分析仪照相和扫描分析,检测其相对表达量。IFN-γI、L-4和G3PDH分别在202、3162、82 bp处出现明显条带,与GenBank查阅的基因条带大小基本一致;0、6、10、15周表达量依次升高,在15周时最高,IFN-γ尤为明显,它的变化始终大于IL-4。EgM9免疫犬后,能激起犬体内很强的细胞免疫和体液免疫反应,而且细胞免疫处主导地位。实时定量PCR方法为犬感染细粒棘球绦虫及其他疾病的早期诊断和流行病学调查提供了初步依据。

关键词: EgM9 免疫机理 细胞免疫 体液免疫

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结核分枝杆菌三价DNA疫苗的体液免疫与细胞免疫应答

中国兽医科学 2011 北大核心 CSCD

摘要:为研究结核分枝杆菌Ag85B、MPT64和MPT83抗原DNA疫苗在奶牛体内诱导的免疫应答,以PJW4303为载体,构建了上述3种抗原基因的三价DNA疫苗。采用阴离子交换色谱方法提取3种质粒,混合后添加佐剂DDA免疫3月龄荷斯坦奶牛3次,采用ELISA法检测免疫奶牛的特异性抗体效价。利用双抗夹心ELISA定量测定免疫奶牛各月的IFN-γ浓度。结果显示,纯化后的DNA疫苗经质量检验达到动物免疫试验的要求;免疫前奶牛体内特异性抗体为阴性;三免后第30天MPT83、Ag85B和MPT64特异性抗体效价达到最高,均值分别为1∶3 200、1∶2 560和1∶2 880;同时免疫奶牛MPT83、Ag85B、MPT64三种蛋白诱导产生的IFN-γ在三免后第30天达到最高,分别为(630.25±94.45)、(341.65±76.75)、(51.38±9.80)pg/mL,阴性对照组PBS的IFN-γ浓度为(6.48±20.88)pg/mL。每个月的阴性对照与3种抗原相比,差异均极显著(P<0.01)。证实该三价核酸疫苗能同时诱导机体产生细胞免疫应答和体液免疫应答,可能有利于增强疫苗对结核病的抗性。

关键词: 结核分枝杆菌 阴离子交换色谱 DNA疫苗 免疫应答

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12份禾本科牧草苗期抗旱性分析

新疆农业科学 2011 北大核心 CSCD

摘要:【目的】比较研究干旱胁迫下12份禾本科牧草的苗期抗旱性,为抗旱牧草品种的选育提供理论依据。【方法】采用室内盆栽试验方法对牧草进行连续干旱胁迫处理。【结果】将12种禾草的抗旱性大致可以分为3类,冰草和高燕麦草为强抗旱性牧草;内蒙古冰草、中间偃麦草、偃麦草和新麦草为中等抗旱性牧草;鹅观草和披碱草为弱抗旱性牧草。【结论】通过综合比较分析发现在干旱胁迫下冰草和高燕麦草的抗旱性较强,适合在干旱少雨的地区种植。

关键词: 牧草 苗期 抗旱性

新疆玉米新自交系耐旱性鉴定与评价

西北农业学报 2011 北大核心 CSCD

摘要:采用玉米开花期干旱胁迫法,以籽粒产量为主要性状,结合株高、穗位高、穗长、秃尖长、穗行数、行粒数、穗粒数、ASI值等性状,用种质耐旱性指数(DTIg)作为玉米自交系资源耐旱性鉴定与评价的主要指标,对49份玉米自交系耐旱性做了鉴定与评价。筛选出新自672、新自641、新自636、新自534、新自521、新自635、A14-2、运642等8份干旱胁迫条件下花期协调,耐旱性极强的新玉米自交系。

关键词: 玉米 自交系 耐旱性

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玻璃化冷冻对绵羊卵母细胞中母源基因mRNA表达量的影响

畜牧兽医学报 2011 北大核心 CSCD

摘要:为详细了解玻璃化冷冻对绵羊卵母细胞中母源基因mRNA表达量的影响,分别玻璃化冷冻GV期和IVM期(18、24h)绵羊卵母细胞,解冻后进行体外培养。GV期和IVM期卵母细胞经过冷冻-解冻后,卵裂率(10.37%、23.17%、33.07%)均极显著低于对照组(82.96%,P<0.01),且冷冻-解冻后的GV期卵母细胞卵裂率极显著低于冷冻-解冻后的IVM期卵母细胞(P<0.01)。本试验利用荧光实时定量PCR技术检测4种母源基因:Gdf9(生长分化因子-9)、Zar1(合子阻泄因子)、Mater(胚胎必要的母体抗原)、Dnmt1(DNA甲基化转移酶1)在不同处理后的绵羊卵母细胞中的mRNA含量。结果表明,4个基因的mRNA在GV期的表达量均高于IVM期的卵母细胞(P<0.01);经玻璃化冷冻处理后,4个基因的mRNA表达量升高,其中GV期含量最高(P<0.01)。结果提示,绵羊GV或IVM期卵母细胞玻璃化冷冻导致母源基因mRNA表达量升高,可能会对胚胎发育产生负面影响。

关键词: 母源基因 玻璃化冷冻 荧光实时定量PCR

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新疆部分地区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌荚膜多糖分型的研究

中国预防兽医学报 2011 北大核心 CSCD

摘要:为调查新疆奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌主要流行血清型,本研究采用玻板凝集和双重PCR方法对不同地区奶牛乳房炎乳样中分离的117株金黄色葡萄球菌进行血清分型。结果表明荚膜多糖5型占10.26%(12/117),8型占13.68%(16/117),336型占64.96%(76/117),未分型菌株占11.11%(13/117)。该研究为新疆奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌疫苗菌株的筛选提供了依据。

关键词: 奶牛乳房炎 金黄色葡萄球菌 荚膜多糖分型 双重PCR 玻板凝集试验

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